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非淡泊无以明志，非宁静无以致远。——诸葛亮
抗体制备技术的发展及其医学应用
抗体是在对抗原刺激的免疫应答中，B淋巴细胞产生的一类糖蛋白。它是能
与相应抗原特异的结合、产生各种免疫效应（生理效应）的球蛋白。国际卫生组
织将具有抗体活性及化学结构与抗体相似的一类蛋白统一命名为免疫球蛋白，它
与抗体都是指同一类蛋白质。抗体的2条重链和2条轻链根据氨基酸序列变化程
度分为V区和C区，其抗原结合特异性主要由V区中高度变异的超变区决定，3个
超变区共同形成1个抗原决定簇互补的表面，故又称为互补决定区(comp
lementaritydeterminingregion，CDR)。常规的抗体制备是通过动物免疫并采
集抗血清的方法产生的，因而抗血清通常含有针对其他无关抗原的抗体和血清中
其他蛋白质成分。一般的抗原分子大多含有多个不同的抗原决定簇，所以常规抗
体也是针对多个不同抗原决定簇抗体的混合物。即使是针对同一抗原决定簇的常
规血清抗体，仍是由不同B细胞克隆产生的异质的抗体组成。因而，常规血清抗
体又称多克隆抗体（polyclonalantibody，PcAb），简称多抗。多克隆抗体是由
多克隆B细胞群产生的、针对多种抗原决定簇的混合抗体。因为天然抗原是由多
种抗原分子组成的，每种抗原分子又含有许多抗原决定簇，每一种抗原决定簇可
激活相应的B细胞克隆，进而分化、成熟并合成相应的抗体。由于常规抗体的多
克隆性质，加之不同批次的抗体制剂质量差异很大，使它在免疫化学试验等使用
中带来许多麻烦。因此，制备针对预定抗原的特异性均质的且能保证无限量供应
的抗体是免疫化学家长期梦寐以求的目标。随着杂交瘤技术的诞生，这一目标得
以实现。
1抗体的发展
抗体的研究过程经历了免疫血清学研究、单克隆抗体研究和基因工程抗体研
究3个不同阶段。
...
非淡泊无以明志，非宁静无以致远。——诸葛亮
1.1免疫血清学研究阶段
免疫动物产生的抗体是多种抗体的混合物，所以早期制备的抗体是多克隆抗
体.多克隆抗体是人类有目的地利用抗体的第1步，其在生物医学等方面的应用
已有上百年的发展历史.但多克隆抗体具有不均一性，特异性差且动物抗体注入
人体会产生严重的过敏反应等特性，限制了其在疾病诊断和治疗中的应用。
1.2单克隆抗体研究阶段——杂交瘤技术的诞生
淋巴细胞杂交瘤技术的诞生是几十年来免疫学在理论和技术两方面发展的
必然结果，抗体生成的克隆选择学说、抗体基因的研究、抗体结构与生物合成以
及其多样性产生机制的揭示等，为杂交瘤技术提供了必要理论基础，同时，
瘤细胞的体外培养、细胞融合与杂交细胞的筛选等提供了技术贮备。1975年8
月7日，Kohler和Milstein大胆地把以前不同骨髓瘤细胞之间的融合延伸为将
丧失合成次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（hypoxanthineguanosine
phosphoribosyltransferase，HGPRT）的骨髓瘤细胞与经绵羊红细胞免疫的小
鼠脾细胞进行融合。融合由仙台病毒介导，杂交细胞通过在含有次黄嘌呤
（hypoxanthine，H）、氨基喋呤（aminopterin，A）和胸腺嘧啶核苷（thymidine，
T）的培养基（HAT）中生长进行选择。在融合后的细胞群体里，尽管未融合的正
+
常脾细胞和相互融合的脾细胞是HGPRT，但不能连续培养，只能在培养基中存活
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