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核农学报2023,37(9):1775~17811775
JournalofNuclearAgriculturalSciences
文章编号:1000⁃8551(2023)09⁃1775⁃07
脂多糖对绵羊输卵管上皮Claudin-1和Occludin表达的
影响
曾建林吕建树段宏伟杨帅张榕张勇胡俊杰*
(甘肃农业大学动物医学院/甘肃省动物生殖生理及繁殖调控重点实验室,甘肃兰州730070)
摘要:绵羊等反刍动物瘤胃的异常代谢及炎症会造成脂多糖(LPS)异位诱发集体其他部位炎症风险,
然而LPS对绵羊输卵管上皮屏障关键蛋白紧密连接蛋白封闭蛋白-1(Claudin-1)和闭合蛋白(Occludin)
的影响尚不清楚。为阐明LPS对绵羊输卵管上皮Claudin-1和Occludin的影响,本研究采集成年绵羊输
卵管通过苏木精-伊红染色、免疫荧光、蛋白免疫印迹法(WB)检测,并体外培养原代输卵管上皮细胞通
过免疫荧光、蛋白免疫印迹法及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进行试验。结果表明,Claudin-1和
Occludin表达于绵羊输卵管伞部、壶腹部和峡部上皮,Claudin-1和Occludin在伞部的表达量显著高于壶
腹部和峡部。采用浓度为0、10、50和100ng·mL-1的LPS诱导原代壶腹部上皮细胞,发现LPS可促进
TLR4、NFκB及TNFα的mRNA表达,并影响Claudin-1和Occludin的蛋白表达水平。表明LPS在短时间
内可诱导输卵管炎症反应,并导致上皮细胞Claudin-1和Occludin表达紊乱。进一步提示反刍动物瘤胃
异常代谢及炎症导致的LPS易位,可能会诱发输卵管炎症反应,造成输卵管上皮屏障损伤及生理功能障
碍,严重影响绵羊的经济价值。本研究结果为反刍动物瘤胃异常代谢及炎症疾病期间LPS易位造成全
身性炎症的相关研究提供了理论基础。
关键词:绵羊;输卵管;脂多糖;Claudin-1;Occludin
DOI:10.11869/j.issn.1000⁃8551.2023.09.1775
输卵管是女性生殖系统的一部分,是连接卵巢和疫防御机制,诱机体发炎症反应[5-6]。反刍动物异常代
子宫的管道,为精卵结合提供适宜的环境,是输送卵母谢和炎症性疾病是外周循环LPS的主要来源。研究表
细胞以及合子初步发育的重要场所。输卵管内环境紊明,亚急性瘤胃酸中毒期间产生的大量LPS会造成瘤胃
乱可能影响输卵管功能,导致雌性动物生产性能下上皮炎症反应,破坏上皮屏障,导致LPS易位至外周循
[1][6-8]
降。输卵管上皮细胞之间通过紧密连接(tight环,诱发乳腺、子宫等部位炎症反应。如患有子宫内
junction,TJ)蛋白相连。紧密连接蛋白广泛存在于输膜炎的奶牛血清中的LPS浓度上升,卵泡液中的LPS浓
[9-11]
卵管上皮,参与上皮细胞间的紧密连接及细胞粘附,调度比正常时期高出2900倍;肠道菌群紊乱造成肠道
节细胞间物质转运、防止细菌、内毒素等侵染,构成了炎症和肠上皮损伤,导致LPS或病原菌通过血液从肠道
[2][
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