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酚氯仿法提取DNA主要步骤和原理.docx

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酚氯仿法提取

酚氯仿法提取DNA主要步骤和原理

酚氯仿法提取DNA主要步骤:

将动物组织放在1.5ml的离心管中,分别用

75%、50%酒精和纯水梯度脱酒精。每个梯度脱水时间为5-10min

将组织放入研钵中,参加适量DNA裂解液

〔300μl〕,研磨后再参加300μlDNA裂解液冲洗研磨棒。

将研磨好的组织液用移液枪加到1.5ml离心管,在管中加10μl蛋白酶K,用封口带将离心管封口,放入摇床〔56℃,5h〕。

参加等体积的Tris饱和酚〔500μl〕,摇匀

〔10min〕。

离心:12000R,7min,4℃。离心后分成上中下三层,上层为DNA

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