安捷伦型高效液相色谱仪详细操作规程 .pdfVIP

1.目:规范Agilent1260高效液相色谱仪维修、保养、校正操作。

2.适用范围:本企业化验室Agilent1260高效液相色谱仪维修、保养。

3.相关责任:化验室精密仪器室

4.引用标准:仪器说明书及Agilent化学工作者现场操作培训教材

5.规程内容:

5.1开机前准备

5.1.1依据试验要求配制流动相,须经0.45μm滤膜过滤,以后再进行脱气

处理,使用前必需用超声波振荡l0-15min,按无机相和有机相分开别装入溶

剂瓶A（装有洗盐装置,最好固定盛放无机盐水相）、B中;对照品和样品

溶液进样前要经0.45μm滤膜过滤。

5.1.2若流动相中含有缓冲盐,则必需以每分钟2～3滴速度虹吸10%异丙醇

水冲洗seal-wash,以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。

5.2.采样前准备

5.2.1打开计算机,进入Windows系统,从上到下依次打开各模块电源。

5.2.2待各模块自检完成后,双击桌面上“仪器1联机”图标,将自动进入化

学工作站画面。

5.2.3从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,也可单击工作站画面

左侧“方法和运行控制”项,进入方法和运行控制窗口。

5.2.4打开Purge阀（逆时针）,右击“泵”图标出现参数设定菜单单击“设

定泵”选项进入泵编辑画面。

5.2.5设“流量”逐步增大流速至5ml/min,A通道设到100%,单击“确定”。

5.2.6单击“泵”图标,出现参数设定菜单,单击“泵控制“选项选中“开”

单击“确定”则系统开始Purge,直到管路内由溶剂瓶A到泵入口无气泡为

止;切换B通道(B通道设到100%)继续Purge直到全部通道管路内均无气

泡为止。(查看柱前压力,若大于10Bar,则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。)

5.2.7将泵流量设到0.5ml/min,若使用双泵则应设定溶剂配比,如A=80%,

B=20%;关闭排气阀（顺时针）;再将流量设到0.8ml/min,2分钟后设定至

方法所需流速,冲洗色谱柱20-30min。

5.2.8单击泵下面瓶图标,输入溶剂瓶A、B内流动相实际体积（为保护泵

和色谱柱,请按实际体积输入）和停泵体积单击“确定”,假如各溶剂瓶溶

剂体积小于停泵体积,泵将自动停止。

5.2.9把缓冲液（用于柱子过渡,与流动相等百分比乙腈/水、甲醇/水或10%

水溶液）换成流动相,排气后,逐步增加至所需流速,待柱压基础稳定后,

打开检测器等,观察基线情况。

5.3.数据采集

5.3.1采集方法编辑

5.3.1.1编辑完整方法:从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项,选中除“数

据分析”外三项,单击“确定”进入下一画面。

5.3.1.2方法信息:在“方法注释”栏中加入（如方法用途等）,单击“确定”

进入下一画面。

5.3.1.3泵参数设定:在“流速”处输入方法所需流量（如1ml/min）;默认

为A为100%,如需二元高压,在“溶剂B”处输入所需百分比,则溶剂

A=100-B,也可“插入”一行“时间表”编辑二元梯度;在“压力限”处输

入柱子最大耐高压（提议设定200bar）以保护柱子,单击“确定”进入下一

画面。

5.3.1.4VWD检测器参数设定:在“波长”下方空白处输入所需检测波长,如

254nm;在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框,选择适宜响应时间

（如0.1min(2s)）;如有特殊要求,也可在“时间表”中能够“插入”一行

输入随时间切换波长（如1min波长=300nm）,点击“确定”。

5.3.1.5在“运行时选项表”中选中“数据采集”选项,单击“确定”。

5.3.1.6单击“方法”菜单选中“方法另存为”输入方法名,单击“确定”。

5.3.1.7从“视图”菜单中选中“在线信号”,选中“信号窗口1”,然后单击

“改变”钮,将所要查看信号移到右边框中,单击“确定”。

5.3.1.8进样器参数设定:在进样模式中输入“进样量”xxμl,默认为20μl。

“标准进针”只能输入进样体积,此方法无洗针功效。“针清洗后进样”能

够输入进样体积和洗瓶位置为xx,此方法针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶

中洗针。

进样器进样程序参数设定:选中使用进样程序,在“函数”中添加对应函

数即可按程序进样。

5.3.1.9TCC检测器参数设定:在“温度”左侧下面方框内输入所需温度,并

选中它,右侧选中“与左