液相色谱液质简易操作规程 .pdfVIP

液相色谱-质谱联用仪操作规程

(WatersAlliance2695/QuattroMicro)

一、准备

流动相：配制所需流动相，并且放入超声波中脱气10分钟以上。

标准或样品：按要求对样品进行前处理，配制好标准。

检查：检查氮气压力，气源压力不低于6-7bar(相当于0.6-0.7Mpa)。

检查质谱后机械泵中的泵油不得低于最低线。

检查电源是否连接好。

二、开机

打开液相色谱（仪器左侧右上角）和质谱电源（仪器底部）开关。

打开计算机。仪器完成自检后，双击计算机屏幕上MassLynx图标。

液相部分

1.换上所需流动相：

管路A：可换为无机盐溶液或水；

管路B：请保持为甲醇；

管路C：可换为乙腈；

管路D：其他有机溶剂。

2.控制面板上显示Idle，进入面板控制模式。按Menu/Status键，进入主显示屏“Status（1）”

界面。

3.通过方向键，把主显示屏上的亮白条移到“Degasser的”“Mode”“Off按”“Enter键”，选为“On”，

再按“Enter，打开脱气开关。”

4.把亮白条移到“Composition，”设定所用其中一个流动相（例如A）的比例为100％，“Enter”

回车后，再按右下角“DirectFunctions键，”出现另一对话框，选择WetP“rime”，设定流速和时间

（5mL/min，3min即可），按“OK”键，排出管路气泡。结束后，在“Composition中”移动亮白条，

依次设定所用的其他流动相B、C、D为100％，重复上述操作。

5.同样，在主显示屏上设定流动相A百分比为100％，进入“DirectFunctions对”话框，选择

“PurgeInjector”，按“Ok”。之后依次设定流动相B、C、D，重复此操作。

6.设定流动相比例：把亮白条移到“Composition”，依次设定所用流动相A、B、C、D的百分

比，按“Enter”。

7.将柱温箱打开，换上所用色谱柱（注意色谱柱流向），将二极管阵列检测器（PDA）的“out”

出口接废液瓶；如未使用PDA，可直接将柱子流出端的PEEK管接废液瓶。把亮白条移到“Col

Htr”，设定柱温，按“Enter”。

8.把亮白条移到“Flow”处，设定流速，按“Enter”，此时开始平衡柱子（一般10倍柱体积）。

质谱部分

1.进入MassLynx页面后，点击左边MSTune进入质谱控制页面。

2.点击Options出现下拉菜单，选择“Pump”开始抽真空。待真空达到一定状态可以进行实验。

3.点击Tune页面右下角PressforOperate，待灯变绿，点击Gas提供脱溶剂气和锥孔气（注意

不要在sourcetemperature低于100℃时关闭气体）。

4.用标准进行质谱调谐，优化质谱条件。通过调节“ES＋Source”和“Analyser”中的各项参

数使得质谱峰信号达到最强。

三、设定方法

液相方法：点击左侧“InletMethod”图标编辑液相方法。

点击进入“Inlet”页面设定各项参数。在“SolventsandFlows”窗口设定流动相比例和名称，设

定流速和程序运行时间；“ColumnSetup”中设定柱温；在“PumpGradient”窗口设定梯度。

点击“FileSaveAs…保存方法.”（····.wat·）。

点击ChangeMode图标切换至计算机控制模式，液相面板上显示为Remote。点击“Load

Method”开始运行液相方法。

质谱方法：点击左侧“MSMethod”图标编辑质谱方法。有五种方式可供选择可选择。

点击“MSScan”为全扫描模式：设定质谱扫描开始和终止范围、扫描时间、Cone值和离子源

模式以及数据显示模式等；

“MRMScan”为选择离子模式：设定选择的母离子和子离子、驻留时间、Cone值和Collision

值、扫描间隔和回扫时间、狭缝宽度、重复次数数据显示等

“DaughterScan”为子离子模式、“ParentScan”是母离子扫描模式、“NeutralLoss“中性丢失，

设定参数同上。

四、编辑样品列表-运