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维生素B12标准操作规程

1.【实验目的】

为了保证维生素B12可测定结果的准确性，以及可靠性。

2.【职责】

2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

2.2本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：

室负

责人、科主任。

3.【样品类型及实验前准备】

3.1样本准备：血清和血浆,人血清（包括采集在血清分离管内的人血清）、人血浆，

采集于以下抗凝管：

EDTA钾肝素铵

肝素锂氟化钠/草酸钾

肝素钠血浆分离管（肝素锂）

3.2患者准备：实验前正常饮食，晨起空腹，安静状态下抽取静脉血，条件特殊情况

下可

空腹抽血检测。

3.3容器，添加剂类型：血清（包括在血清分离器管中采集的血清），血浆（EDTA三

钾、肝素锂、肝素钠），使用玻璃管或塑料管分离样本。

3.4仪器设备：雅培ARCHITECTi10SR,低速离心机

3.5实验试剂：

3.5.1ARCHITECTB12试剂盒（7K61）

微粒子：1瓶（6.6mL/1测试瓶；27.0mL/5测试瓶）内因子（猪）包被微粒子，

储存于含蛋白（牛）稳定剂的硼酸盐缓冲液中。最低浓度：0.1%固

体物质。

防腐剂：抗菌剂。

结合物：1瓶（5.9mL/1测试瓶；26.3mL/5测试瓶）吖啶酯标记的B12结合物，

储存于MES缓冲液中。最低浓度：0.7ng/mL。抗菌剂：ProClin。

项目稀释液：1瓶（10.0mL/1测试瓶；51.0mL/5测试瓶）B12项目稀释液，由

含EDTA的硼酸盐缓冲液组成。

防腐剂：抗菌剂。

预处理液1：1瓶（27.0mL/1测试瓶；50.4mL/5测试瓶）B12预处理液1，含

1.0N氢氧化钠和0.5%氯化钾。

预处理液2：1瓶（5.5mL/1测试瓶；25.9mL/5测试瓶）B12预处理液

2,含a-硫代甘油和EDTA。

预处理液3：1瓶（5.5mL/1测试瓶；25.9mL/5测试瓶）B12预处理液

3,含在硼酸盐缓冲液中配制的双氯钻胺，缓冲液含蛋白（鸟）稳定剂。

防腐剂：叠氮钠。

4.【实验原理】

ARCHITECT维生素B12项目以一种包含样本自动预处理的两步检测法为基础，用于测

定人

血清或血浆中的维生素B12.检测使用的方法是Chemiflex,即化学发光微粒子免疫检

测法

（CMIA）与灵活的检测模式相结合。将样本和预处理液1、2、3混合在一起。然后,吸

取部

分预处理后样本至新的反应杯（RV）内。将预处理后的样本与项目稀释液、内因子包

被的

顺磁微粒子混合。样本中存在的B12结合到内因子包被的微粒子上。洗涤后，进入第

二步，

加入B12吖啶酯标记结合物。接着向反应混合液中加入预激发液和激发液；然后测量

产生

的化学发光反应，以相对发光单位（RLU）表示。样本中的B12量与ARCHITECTi系统

光

学系统检测的RLU成反比。

5.【操作步骤】

5.1第一次把ARCHITECT维生素B12测定试剂盒装机前，需要翻转试剂瓶，使运输过

程中沉淀下来的微粒重新悬浮起来。首次装载微粒子试剂后，无需对其进行再次

混合。翻转微粒子试剂瓶30次。观察试剂瓶，确定微粒子是否重新悬浮。如果微

粒子仍附着在瓶壁上，那么需要继续翻转直至微粒子完全悬浮为止。微粒子再次

悬浮后，取下并丢弃瓶盖。佩戴干净的手套，取出一只软盖。小心地把软盖盖在

瓶。

5.2把ARCHITECT维生素B12测定试剂盒装载到ARCHITECTi系统，检查检测所需的

试剂是否齐全。确保所有试剂瓶上都盖有软盖。有关加载试剂的详细信息，