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1、程序
1.1仪器组成
WatersE2695型高效液相色谱仪由Waters2489紫外检测器、WatersE2695分离
单元【包括WatersE2695溶剂管理系统(四元梯度泵、四通道GPV、溶剂瓶、
通道管路、泵头密封清洗系统、进样器清洗系统)、WatersE2695样品管理系
统(自动进样器、样品盘)】以及可控调节柱温箱、Empower2软件、HP计算机
和共享HP-1800打印机、采集服务器、主服务器等组成。
1.2使用前的准备
1.2.1首先,在开机前对被检测样品按检验标准进行制备、过滤等预处理;其次
对该品种项下规定的流动相进行制备、过滤等前处理;按色谱条件及待检药物成
分溶解性配制泵头清洗液和洗针溶液,比较通用的泵头清洗液为15%~20%的异
丙醇溶液,洗针溶液为50%左右的甲醇溶液。
1.2.2在未接通电源前,检查柱温箱、检测器、输送泵等开关,应放置在“O”的位
置。
1.2.3打开电路电源开关,开启UPS电源开关,使整个电路系统处于稳压状态。
开启主服务器,待主服务器自检完成,再开启各节点采集服务器,使局域网络处
于正常链接状态。
1.2.4将配制好并经过预处理的流动相、泵头清洗液和洗针溶液放入溶剂托盘,
将相配套的连接有过滤头的溶剂管路插入相应溶剂瓶中。按流向安装好所需使用
的色谱柱。
1.2.5将WatersE2695分离单元总开关和Waters2489紫外检测器开关置于“I位”
置,开启分离单元和检测器。仪器开始自检,自检完毕,分离单元控制面板显示
区显示“Idle(空闲)”,检测器控制面板显示区显示上次检测波长和实时检测信
号。仪器开机完成。
1.2.6点击控制面板上Menu/Status“”键,进入WatersE2695分离单元控制模式。
按显示区“DirectFunction”下方按钮,进入分离单元运行准备模式。按控制面板
上的“▲”、“▼”键将光标移动到“2.systemprep”,点击“OK”下按钮,系统自动进
行如下诊断操作:灌注和清洗泵头、灌注和清洗进样针、灌注和清洗注射器、逐
个溶剂瓶管路排液。也可以直接由“Idle(空闲)”状态模式,点击“Diag”,进入诊断
模式,分别选择“PrimeSealWash”、“PrimeNeddleWash”进行“灌注和清洗泵头、
灌注和清洗进样针”,然后点击Halt“”手动停止,点击“EXIT”退出诊断模式,进
入状态模式,在状态模式下,点击“DirectFunction”下按钮,移动光标至“4.Purge
Injector”手动清洗注射器。然后按下Menu/Status“”键,进入控制模式,移动光标
至你需要排液的通道,输入“100”,点击“Enter”,然后点击“DirectFunction”下按钮,
选择“3.WetPrime”,点击“OK”,对你所选择的通道进行手动排液操作。然后开启
泵,检查输送泵、色谱柱及管路接头处是否漏夜。操作完毕,运行准备结束。
1.3软件运行
1.3.1软件启动
各项准备完毕,开启电脑,双击桌面上“Empower2”图标,输入系统管理员分配
的使用者和密码,在“高级”选项,可根据使用者习惯选择“Pro”或”QuickStart”界
面,进入操作系统。也可以由系统管理员分配系统资源时,预先设定。
1.3.2编辑配置管理器和新建项目
1.3.2.1点击“配置系统(ConfigureSystem)”,进入“配置管理器”界面。
1.3.2.2展开“项目(Project)”,选中“使用者姓名”,右键单击,选择“新建(N)”,“项
目(P)”,进入“新项目向导”界面,选择“使用者姓名”作为新建项目的父项目,
点击“下一步”。输入新建项目的空间大小,点击“下一步”,“下一步”,“下一步”,
选择从其他项目需要拷贝的内容,一般以“使用者姓名”项目为复制源,点击“下
一步”,命名新建项目,如果需要全面审计追踪,输入“项目注释”,点击“完成”。
1.3.2.3当所建项目空间不足,需对“项目属性”进行重新编辑。方法是:在“配置
管理器”界面,选中所建项目,右键单击,选择“属性”,进入“项目属性”界面,
在“通用”选项,更改项目数据库空间配额,单击“确定”即可。
1.3.3运行样品
1.3.3.1导入“运行样品”
点击“运行样
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