TGXAS-富硒花生中硒形态的测定高效液相色谱—电感耦合等离子体质谱法编制说明.docxVIP

PAGE22

团体标准《富硒花生中硒形态的测定高效液相色谱—电感耦合等离子体质谱法》（征求意见稿）

编制说明

项目来源

根据《关于下达2021年第十一批团体标准制修订项目计划的通知》（桂标协﹝2021﹞28号）文件精神，由广西大学提出，广西大学、广西西大检测有限公司、杭州市食品药品检验研究院、苏州尧智生态环保科技有限公司共同起草的团体标准《富硒花生中硒形态的测定高效液相色谱—电感耦合等离子体质谱法》（项目编号：2021-1101）。

项目背景及目的意义

食物是人体硒元素的主要来源，通过植物生产将土壤硒转化为食物硒，提高食物链硒水平是预防硒缺乏和调控硒营养的有效途径。硒在自然界和生物体中有多种形态，自然界中的硒多以无机盐形式存在，据硒盐的毒理分析表明，无机硒均为剧毒，其中毒性较大的有硒酸盐Se（VI）、亚硒酸盐Se（IV），不易被人体吸收；而有机硒具有较高的生物利用度和生物活性，与人体代谢密切相关的有硒代蛋氨酸（SeMet）、硒代胱氨酸（SeCys2）、甲基硒代半胱氨酸（MeSeCys）等。

随着我国居民保健需求的增加，保健品市场不断扩大，开发利用硒资源,生产富硒食品、保健品，已逐渐成为我国食品行业的一个新热点。随着研究水平和人类身体健康要求的不断提高，人们认识到元素的生理效应、不光与元素的含量相关，只有当元素以特定形态存在，并处于一定浓度范围内时，才会对生物体和生命系统发挥作用。与水稻等作物相比花生具有更强的硒元素富集能力，随着人们保健意识的逐渐提升，对富硒花生的需求量逐渐增加，富硒花生价格30元/公斤，普通花生12元/公斤，价格差异明显。由于当下有关硒的检测检测方法和判定标准多以硒的总量为标准，部分不法商人为牟取高额利润，通过添加无机硒来提高总硒含量的“富硒”产品，导致富硒市场鱼龙混杂，严重制约富硒花生产业的发展。本标准《富硒花生中硒形态的测定高效液相色谱—电感耦合等离子体质谱法》的前处理简便快捷，试剂无毒无害，检测特异性强、灵敏度高，定量精准，满足花生中无机硒和多种有机硒形态分析的需要（硒代蛋氨酸、L-硒代胱氨酸、Se-甲基硒代-L-半胱氨酸、硒酸钠、亚硒酸钠），为食品中硒形态的分析鉴定提供了切实可行的方法依据。本标准的制定推动硒检测技术的发展与进步，有助于对硒的生物学功能进行更全面而深入的了解；有助于富硒花生的深度开发利用，提高富硒花生的经济价值；有助于制定花生中有毒无机硒限量，为科学有效的进行风险评估提供技术支撑和数据支持。

目前关于花生硒含量限定主要为GH/T1135-2017《富硒农产品》豆类总硒含量0.1mg/kg～1.00mg/kg,硒代氨基酸总量＞65％、DB45/T1061-2014《富硒农产品硒含量分类要求》油料类总硒含量0.05mg/kg～0.5mg/kg；T/LYFLA004-2018《富硒花生》富硒花生果总硒含量0.1mg/kg～0.3mg/kg,富硒花生仁总硒含量0.2mg/kg～0.3mg/kg；检测主要为GB5009.93-2017《食品安全国家标准食品中硒的测定》、GB5009.268-2016kw《食品安全国家标准食品中多元素的测定》，关于硒的测定方法主要有氢化物发生－原子荧光光谱法(HG－AFS)、氢化物发生－电感耦合等离子体原子发射光谱法、电化学分析法、氢化物发生－原子吸收光谱法(HG－AAS)、荧光法和极谱法等。当下检测方法仍以消解为主，硒限量主要为总硒含量或区分2种硒形态，且操作复杂，导致花生中硒含量限量安全阀值较窄，仍以硒总量、或仅可区分硒代氨基酸含量，远远不能满足当下告诉发展的富硒行业。根据调查发现，当下花生硒检测还存在的问题如下：目前报道花生硒形态的检测方法主要有分光光度法、毛细管电泳一电化学发光法、液相色谱法等，但均存在样品前处理复杂或检测硒形态种类较少等不足，效率低。高效液相色谱一电感耦合等离子体一质谱(HPLC—ICP—MS)联用技术具有接口简单、应用广泛、检出限低、分离效率及灵敏度高等优点，可同时完成不同硒形态的测定。当前食品中硒形态含量检测多针对粮谷，而花生研究相对较少，花生组成成分非常复杂，主要包括蛋白质、脂肪和糖，此外还含有有糖类、维生素A、维生素B6、维生素E、维生素K，以及矿物质钙、铁等营养成分，含有8种人体所需的氨基酸及不饱和脂肪酸，含卵磷脂、胆碱、胡萝卜素、粗纤维等物质，且花生基质以脂肪为主，与粮谷相比存在较大差异，但所用酶提取剂未有差异，导致酶提取过程中无法有效破坏植物组织和细胞，细胞内天然物质溶出量低，提取效率较低，不能满足当前检测要求。本文件通过引用高效液相色谱－电感耦合等离子体－质谱联用技术，并选择花生特异性水解酶（蛋白酶），达到简化操作、同时检测5种形态硒的目的，大幅度提高富硒