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作物学报ACTAAGRONOMICASINICA2011,37(3):484488
ISSN0496-3490;CODENTSHPA9E-mail:xbzw@
DOI:10.3724/SP.J.1006.2011.00484
应用RNA沉默技术获取抗黄瓜花叶病毒(CMV)和烟草花叶病毒
(TMV)转基因烟草
牛颜冰王德富姚敏闫钊由文鑫
山西农业大学生命科学学院,山西太谷030801
摘要:RNA沉默是迄今最为有效的抗病毒策略,利用该策略不但能获得免疫转基因植株,且所得植株不易与其他
病毒基因重组或异源包壳、生物安全性较高。将本实验室已构建的携带有烟草花叶病毒(TMV)部分移动蛋白基因
(ΔMP)和黄瓜花叶病毒(CMV)部分复制酶基因(ΔRep)反向重复结构的植物表达载体pBIN438-MP-Rep(i/r),用农杆菌
浸润法转化普通烟草品种K326,共得196株转化植株,经卡那霉素筛选和PCR检测发现128株为阳性转基因植株;
PCR-Southern和RT-PCR分析表明外源基因已整合到烟草基因组并在转录水平上得到表达;ELISA结果显示20.3%的
转基因植株对CMV和TMV复合侵染表现免疫性。本结果为利用RNA沉默技术进行植物抗多种病毒育种提供重要
数据,为防治其他多种病毒复合侵染提供借鉴。
关键词:RNA沉默;黄瓜花叶病毒;烟草花叶病毒;双病毒抗性
TransgenicTobaccoPlantsResistanttoTwoVirusesviaRNASilencing
NIUYan-Bing,WANGDe-Fu,YAOMin,YANZhao,andYOUWen-Xin
CollegeofLifeScience,ShanxiAgriculturalUniversity,Taigu030801,China
Abstract:
Rep(i/r)consistingtheinvertedrepeatofTMV-ΔMPandCMV-ΔRepfusionfragmentwastransformedintotobaccocultivarK326
–1
Kan.Onehundredand
viaAgrobacterium-mediated.Thetransformantswereselectedintheculturemediumwith100mgL
assayindicatedthatabout20.3%transgenicplantswereimmunetotheco-infectionwithTMVandCMV.Thisresultwillprovide
tocropsanimportantreferenceforplantanti-viralbreedingandforpreventingtheviralco-infection.
Keywords:RNAsilencing;Cucumbermosaicvirus;Tobaccomosaicvirus;Dual-virusresistance
[1-3]
黄瓜花叶病毒(CMV)和烟草花叶病毒(TMV)是病毒的抗性。但这种方法获得高抗转基因植物的
世界范围内分布最广、寄主最多、且极易传播的两几率较小,且该策略还存在异源重组等生态安全性
种植物病毒,它们单一或复合侵染均能引起农作物问题[4]
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