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鱼饲料表观消化率测定方法的综述

黄小燕吴天星

摘要消化率是评价饲料营养价值的重要指标，也是确定日粮配方的依据。由于鱼所生长环境的特殊性，

使得测定鱼的消化率比较困难。体外测定法主要采用酶解法，而体内测定法主要采用间接指示剂的方法进

行测定，以酸不溶灰分（AIA）、Cr2O3、Y2O3、La2O3、Yb2O3为指示剂测定表观消化率，不同的指

示剂在不同的鱼、不同的饲料中其测定值的精确性有较大的差异。文中简要的介绍了3种体外测定方法并

重点叙述了指示剂的使用，为鱼消化率测定方法提供参考。

关键词表观消化率；鱼；指示剂；测定方法

中图分类号S816.17

消化率是动物所摄取的饲料成分中，可消化养分占食入饲料养分的百分率。水体环境的特殊性决定了鱼消

化率测定的特异性和复杂性，因此选择准确、简便的消化率测定方法对评价鱼饲料的营养价值有重要意义。

1体外消化法

体外消化法主要是以商品酶或试验鱼的粗酶提取液作为消化酶，模拟鱼体消化环境进行体外消化。虽然体

外消化法不能反应体内的真实消化情况，但其测定值与体内测定值有一定的相关性，而且操作简便、快速、

成本低，对确定日粮配方提供极其有用的参考。

1.1常规酶解法

常规的体外酶消化方法为二步酶解：先将试验饲料在pH=2的胃蛋白酶缓冲液中酶解2h后转移到pH=8的

蛋白复合酶的缓冲液中继续振摇酶解24h，再加入10%的三氯醋酸沉淀未被酶解的蛋白及多肽，离心或过

滤得到的残渣即为不被消化物[1，2]。

1.2透析法

由于在传统的封闭体系内进行体外消化过程中，随消化时间的延长，消化产物不断积累，对酶解产生抑制

作用，而透析法则克服了产物的抑制作用，透析膜的透析作用模拟了小肠的吸收作用。黄瑞林等（1999）

[3]试验证实随着透析液的增加粗蛋白的消化率升高，且用此法测得的体外表观消化率与体内消化率的相关

系数为0.999，席鹏彬等（2003）也证实，用体外透析法测得菜粕蛋白体外消化率与体内表观消化率显著

相关[4]。

1.3pH值测定法

由于蛋白在水解过程中肽键断裂释放质子，因此可利用pH变化测定蛋白水解程度。pH值测定技术分为两

种，pH下降法(pHdrop)及pH恒定法（pHstat）。pH下降法是将底物与酶混合物在pH=8的环境下酶解

10min后测定pH的下降[5]。

恒pH法克服了由于pH下降而导致的酶活性降低的缺点，它利用全能电位滴定仪随酶反应体系pH的变化

不断向反应体系中滴加0.1M的NaOH，保持体系pH不变，根据滴定所用的NaOH的体积计算样品蛋白

水解率[6]。

蛋白水解率（%）=[（B×Nb×1.5/M×（S%/100））/8]

×100%

式中：B——NaOH滴定体积（ml）；

Nb——NaOH浓度；

M——样品质量（g）；

S——样品蛋白含量。

体外消化法操作简便，适用于对商品原料及饲料营养价值的评定，尤其是pH测定法，不仅简便快速，与

体内消化的相关性也在0.7～0.9之间[5，7]。但是，体外消化法也存在一些不足，首先体外的消化环境与

鱼体的环境有较大的差异，其次所用的体外消化酶特异性与鱼肠道酶存在差异，这导致体外测定值可靠性

差。

2体内消化法

体内消化法就是饲给鱼试验日粮，由消化不了而从粪中排泄出的粪量测定饲料在鱼体内的消化率。粪中所

出现的成分不仅是饲料的不消化成分，还混有在消化过程中从体内所分泌的消化液以及由消化道脱落的上

皮细胞、肠内细菌等成分，通常我们所测的饲料的消化率都不考虑内源的代谢物，即表观消化率（Apparent

digestibility,AD）。

AD（%）=[（摄取饲料中的成分-粪中的排出成分）

/摄取饲料中的成分]×100%

2.1直接法

又称总粪收集法，就是测量动物总的饲料食入量以及排出的动物粪量求得消化率。直接法必须正确测定饲

料的摄取量和粪的排出量，这在水体进行非常困难，首先总粪收集法的工作量大，其次在水体中准确回收

未被采食的饲料比较困难。为了使测定值更加准确，需要进行养分流失校正，即通过计算未被采食饲料溶

于水的部分以校正实际采食量。Smith（2004）[8]研究表明，用全粪收集法测定虾的消化率值，其变异系

数明显小于以Cr2O3为指示剂的测量值，说明全粪收集法能比较稳定、精确的反映消化率值。但全粪收集

法工作量