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猪繁殖与呼吸综合症的病因、流行病学及防治措施 - 养猪技术 .pdfVIP

猪繁殖与呼吸综合症的病因、流行病学及防治措施 - 养猪技术 .pdf

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猪繁殖与呼吸综合症的病因、流行病学及防

治措施-养猪技术

猪繁殖与呼吸综合症又称“猪蓝耳病”是由猪繁殖与呼吸综合症

病毒(PRRSV)所引起的猪繁殖障碍和呼吸疾病为主要特征的一种传染

性疾病。该病于1987年首次在美国发现,此后在世界许多国家都有该

病例的报道,我国于1996年由郭宝清等在流产胎儿中分离到PRRSV。

近年来,全国许多省份都有该病流行的报道,是我国危害严重的疾病

之一,给养猪业带来重大经济损失。下面一起来了解一下:猪繁殖与

呼吸综合症的病因、流行病学及防治措施。1、病原该病毒属于动脉炎

病毒科,动脉炎病毒属。1991年在荷兰兽医研究中心,从感染的病猪

分离得到,并命名Lelystad病毒(LV)。病毒粒子呈卵圆形,有囊膜,

直径50~65nm,为单股正链RNA病毒。其分为两个毒株型,即欧洲

型和美洲型,两者在抗原性上有一定的差异。2、流行病学目前,猪是

唯一感染PRRSV的动物,其主要侵害繁殖母猪和仔猪,而育肥猪发病

较温和。该病可以通过空气、直接接触、精液及粪便等多种途径传播,

还可以通过胎盘感染胎儿,使胎儿致病。另外,猪场卫生条件差,饲

养密度大,也是该病流行的不利因素。3、诊断方法在生产实践中可以

根据妊娠母猪后期发生流产、死胎、木乃伊胎,新生仔猪死亡率高,

发病仔猪出现间质性肺炎的特征性病变及临床症状,可以初步诊断为

PRRS。但该病的确诊还有赖于实验室诊断,其方法分为血清学诊断和

病原学诊断。3.1血清学诊断血清学试验操作容易,敏感性和特异性

都较高,因此广泛应用于实验室的诊断方法。目前国内外已建立四种

检测PRRSV抗体的方法:免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)、间接免疫

荧光试验(IFA)、血清中和试验(SN)和间接酶联免疫吸附试验

(ELISA)。3.1.1免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)IPMA由

Wensvoort等在1991年率先建立,是当时最早用于PRRSV的血清学诊

断方法,至今仍是常用的检测手段。其具有较高的敏感性和特异性,

能从感染后6天的猪体中检测出PRRSV抗体。但由于该方法检测的结

果有一定主观性,须肉眼判断,所以不适于大规模检测。3.1.2间接

免疫荧光试验(IFA)IFA敏感性和特异性均较好,在美国被广泛应用,

该法需细胞培养、荧光镜检,结果依肉眼观察,具有一定局限性。3.1.3

血清中和试验(SN)SN特异性好,但由于中和抗体出现时间较晚,不适

用于早期诊断。Yoon等人为添加20%新鲜猪血清或小鼠血清增加补体

含量,提高试验的敏感性,可在PRRSV感染的早期作出诊断。3.1.4

酶联免疫吸附试验(ELISA)ELISA主要用于PRRSV抗体检测,具有良

好特异性和敏感性。Dea[5]等建立的竞争性酶联免疫吸附试验,对人

工感染的猪检测结果表明,其特异性和敏感性分别达到100%和96%。

3.2病原学诊断病原学诊断与其他的诊断方法相比,除了对疾病的准

确诊断外,还可以鉴定毒株类型,并对病毒基因序列的分析提供了方

法依据。另外,随着分子生物学的研究不断深入,病原学诊断也越来

越得到广泛应用,其中包括病毒分离与鉴定和分子生物学诊断。3.2.1

病毒分离与鉴定取病猪的肺脏、血清或淋巴结,将其病料接种原代肺

泡巨噬细胞(PAM)或传代细胞系CL-2621、MarC-145进行培养,

经传代后出现特征CPE者,表明病毒分离呈阳性。也可将细胞培养分

离的病毒,用间接荧光技术和酶抗体法进行鉴定。3.2.2分子生物学

诊断分子生物学技术已成为现代医学不可缺少的一种疾病的诊断方

法。尤其是RT-PCR技术、核酸探针原位杂交技术等诊断方法。

3.2.2.1RT-PCR技术将提取PRRVS的RNA转录成cDNA作为模板,

再对其不同的ORF基因序列设计相应的引物,然后对引物进行扩增,

检测目的基因,由此建立了RT-PCR技术的诊断方法。这种诊断技术

不仅特异性强、效率高,而且能够鉴定毒株类型。Christoph等建立

的TaqManRRT-PCR的方法,对美洲毒株和欧洲毒株感染的群猪

进行准确鉴别。另外,PRRSV的ORF7基因序列保守性较好,因此用RT

-PCR法来诊断PRRS,常以检测

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