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日立F-4500荧光光度计操作规程

一、开机方法：

1，接好仪器及计算机电源线。开机前首先确认主机两个开关：POWER和MAIN均处

于关闭状态。

2，打开仪器电源开关（POWER），5秒钟后再按下氙灯点灯按钮，当氙灯点燃后，再

接通主开关（MAIN）。开启计算机，双击桌面上FLSolutions2.0图标，即进入仪器

工作站界面。

3，此时仪器自检及初始化，等待监视器界面（Monitor）右下方指示“Ready”，并变成

绿色后，开始测量。

二、测量操作方法：

本仪器主要测量功能有以下四项，分别叙述如下：

1，波长扫描（WavelengthScan）。点击监视器界面右侧的Method图标，进入测量方法

设定界面。在General选项卡里选取WavelengthScan。在Instrument选项

卡里输入需要的测量条件：扫描模式（Scanmode），可选激发谱（Excitation）、发射谱

（Emission）或同步荧光谱（Synchronous）；数据模式（Datamode），可选荧光

（Fluorescence）、化学发光（Luminescence）或磷光（Phosphorescence）；在EMWL（或

EXWL）里填入所需的发射（EM）或激发（EX）的波长值；在EXStart（或EMStart）

里填入波长扫描范围的起始波长，在EXEndWL（或EXEndWL）里填入波长扫描范

围的终止波长；ScanSpeed里选择扫描速度；EX和EM里选取激发和发射狭缝的宽度；

PMTVoltage里选择光电倍增管（PMT）的电压值；Response里选择响应时间；如需对

一样品进行多次重复扫描，可在Replicates里选择扫描次数。以上条件设定结束

后，按确定键确认。打开样品室门，将样品加入比色皿，将比色皿插入样品支架

内，再将样品室门盖上。点击PreScan键，进行预扫描。预扫描结束后，

如无错误信息出现，再点击Measure键进行扫描测量。

测量结束后，系统会自动弹出数据处理界面，在此界面内可对数据进行观察、处理。

在file菜单里选取“Saveas”即可将测量结果保存。

特别说明：a，狭缝宽度和光电倍增管电压值可配合选择。一般而言，可选择相对

较小的狭缝宽度和相对较大的光电倍增管电压值。

b，扫描速度不宜过快。一般可选择300或60。

c，如扫描同步荧光谱（Synchronous），EMWL和EXStart的波长差值即是Δλ值。

2，时间扫描（Timescan）。同上进入测量方法设定界面。在General选项卡里选

取TimeScan。在Instrument选项卡里输入需要的测量条件：EXWL和EMWL

里输入所需激发和发射波长值；在Scan里填入所需扫描时间；其余同上。以上

条件设定结束后，按确定键确认。放入样品后，点击Measure键即可进行扫描测

量。

3，光谱定量分析（Photometry）。同上进入测量方法设定界面。在General选项

卡里选取TimeScan。在Quantitation选项卡里输入标准曲线的设定条件：

Quantitation里选择测量方法：Wavelength（波长法）、PeakArea（峰面积法）、PeakHeight

（峰高法）、Derivative（导数谱法）、Ratio（比率法）