最新：新型DNA酶生物传感技术在肿瘤液体活检中的研究进展.pdf

最新：新型DNA酶生物传感技术在肿瘤液体活检中的研究进展

肿瘤对全球公共卫生造成严重威胁，高发病率和致死率，以及治疗成本的

增加，使其成为人类生命的重大健康挑战[1]。液体活检通过分析

循环肿瘤DNA(circulatingtumorDNA,

体液中的生物标志物，如

ctDNA)、循环肿瘤细胞(circulatingtumorcell,CTC)和肿瘤来源细

胞外袭泡(tumorextracellularvesicle,TEV)等，以跟踪肿瘤的动态

进展，实现无创、全面的分子分析[2]，生物传感器通过测量标志

物的浓度、活性或相互作用来提供关键信息，如肿瘤的分子特征和代谢状

态[3]。

一

DNA酶作为种新兴功能核酸，基千其良好的化学稳定性、可编程性、

便千表面固定和信号转导功能化等优势，已广泛用千各种液体活检策略，

其中最为常见的为G－四链体DNA酶和RNA切割活性DNA酶。本综述

将系统总结基千DNA酶的生物传感器在肿瘤液体活检研究中的最新进展，

瘤一步发展和临床

探讨其在肿早期诊断的应用前景，为肿瘤医学领域的进

实践提供指导和启示。

一DNA酶的、基本原理及特性

l．基本原理：DNA酶是具有特定序列的小分子寡核昔酸，通过形成二维或

三维结构而具备特异结合和序列识别等功能[4]。1994年，Gerald

JoyceonaldBreaker发现了第一个DNA酶[5]，催化RNA

和R

的磷酸二酣键的转酷化反应。基千体外选择－指数富集配体系统进化

(SELEX)技术发明[6]，在过去三十年里科研人员已经鉴定出

的

各种具有催化活性的人工DNA序列，统称为DNA酶。不同的DNA酶特

异性催化DNA/RNA切割、RNA/DNA连接、快－叠氮化物”点击“环

加成等众多化学反应，具有构建纳米器件和生物传感器元件的潜力。

2．生物特性：DNA酶具有纳米级的尺寸，可以通过化学修饰、静电吸引等

方式方便地用信号标签或纳米颗粒进行标记以产生各种类型的读出信号，

例如用千激活DNA纳米机器的催化剂和用千组装DNA纳米结构的构建块

[7,8]。同时，与蛋白质酶或核酶相比，DNA酶化学性质稳定，在

强加热、高压和化学加工过程中保持良好的稳定性，因此具有较长的保质

1010,

期和回收利用能力。DNA酶具有高催化效率，速率高达催化效

(kcat/Km)9M-1min-1[9]

率可达10。DNA酶还有可编程

的特性，利用DNA的碱基互补配对进行受控捕获和释放，可以与多种等

温扩增技术相结合，例如滚环扩增(rollingcircleamplification,RCA)、

杂交链式反应(hybridizationchainreaction,HCR)和催化发夹组装

(catalytichairpinassembly,CHA)I[10,11,12]，