高中生物选修微生物实验室培养.pptxVIP

专题2:微生物的培养与应用;;微生物的培养与观察;1、培养基可以分为哪两类？;（1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。

（2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。

（3）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。;选择培养基;不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、无机盐等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。;3、获得纯净培养物的关键是什么？;消毒与灭菌;消毒的方法：;灭菌的方法：;6、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤;1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？;3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？;纯化大肠杆菌;平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作,将聚集的菌钟逐步稀释分散到培养基的表面.

在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落.;微生物的恒温培养;问题讨论;2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？;问题讨论;菌种的保存;课题2

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数;一、课题背景;4、课题目的;一.研究思路;1、实例：;2、实验室中微生物的筛选原理：;15.0g;②在此培养基中哪些作为碳源、氮源？;6、怎样证明此培养基具有选择性呢？;6、怎样证明此培养基具有选择性呢？;1、显微镜直接计数：;2.间接计数法（活菌计数法）

⑴原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先的一个单细胞。

⑵常用方法：稀释涂布平板法。;注意事项

①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。

②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。

③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。;设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。;实例：在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌

落数目的实验时，A同学从对应的106

倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌

落，但是其他同学在同样的稀释度下

只选择出大约50个菌落。分析其原因。;小结：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。;二.实验的具体操作

㈠.土壤取样

从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。

◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。

㈡.制备培养基：

制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。;◆应在火焰旁称取土壤10g。

◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行;㈣.取样涂布;㈣.取样涂布;㈤.微生物的培养与观察;㈤.微生物的培养与观察;◆如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试验不精确，需要重新实验。;微生物的培养与观察;三.结果分析与评价

1.通过对照实验，若培养物有杂菌污染，菌落数偏高；若培养物混入其他氮源，则菌落形态多样，菌落数偏高，难以选择出分解尿素的微生物。

2.提示：选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊，如相差较大，表示实验不精确。;四、操作提示;五.课外延伸

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。;大肠杆菌呈黑色中心,有或无金属光泽;本课题知识小结:;根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合成的。

合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。

优点：标准化生产，组分和含量相对固定;成本低

缺点：缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。;天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。

优点：营养成分丰富，培养效果好

缺点：来源受限;成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;;9、春去春又回，新桃换旧符。在那桃花盛开的地方，在这醉人芬芳的季节，愿你生活像春天一样阳光，心情像桃花一样美丽，日子像桃子一样甜蜜。11月-2111月-21Friday,Novemb