上课《基因工程的基本操作程序》.pptVIP

（3）花粉通道法植物花粉在柱头上萌发后，花粉管要穿过花柱直通胚囊。花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成的花粉管还未愈合前，剪去柱头，然后，滴加DNA（含目的基因），使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞。2、将目的基因导入动物细胞方法:显微注射技术操作程序:提纯含目的基因表达载体取受精卵显微注射移植到子宫受精卵发育新性状动物3、将目的基因导入微生物细胞常用法：Ca2+处理1常用菌：大肠杆菌2微生物作受体细胞原因：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对少3过程：4Ca2+处理大肠杆菌5感受态细胞6表达载体与感受态细胞混合7感受态细胞吸收DNA8基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定目前被较广泛提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。基因操作的基本步骤一、目的基因的获取——将需要的基因从供体生物

的细胞内提取出来。供体生物细胞取出DNA用限制酶剪去多余部分目的基因限制酶目的基因的获取人工合成编码蛋白质的结构基因请举出三个以上的例子1、目的基因主要是指______________________从基因文库中获取利用PCR技术扩增2、获取目的基因的常用方法logo从基因文库中获取目的基因什么是基因文库？什么是基因组文库？什么是部分基因文库？怎样从基因文库中得到我们所需的目的基因？目的基因的有关信息与什么相联系？部分基因文库（如cDNA文库）将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库(genelibrary)基因组文库概念：基因文库（genelibrary）01基因文库中包含了一种生物所有的基因,这种基因文库叫做基因组文库.基因组文库:02基因文库中包含了一种生物的一部分基因,这种基因文库叫做部分基因文库.部分基因文库:基因组文库与部分基因文库的关系第一章思考：基因文库如何构建？如果用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA（也叫cDNA）片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，那么，这个受体菌群体就构成了这种生物的cDNA文库。这种方法称——反转录法cDNA文库的构建mRNA反转录cDNA(互补DNA）DNA聚合酶双链DNA②反转录法：基因重组反转录酶mRNAcDNA基因组DNA文库与cDNA文库的比较A基因组DNA文库cDNA文库B如：根据基因的核苷酸序列基因的功能基因在染色体上的位置基因的转录产物mRNA基因翻译产物蛋白质等特性。依据：目的基因的有关信息。如何从基因文库中得到所需要的基因？ACA、染色体DNA??B、线粒体DNAC、总mRNA??D、tRNA1、构建基因组DNA文库时，首先应分离细胞的01某生物的全套基因就是一个基因文库将含有某种生物不同的许多DNA片段，导入某个生物体内，则这个生物就是一个基因文库含有一种生物所有基因的基因文库叫做基因组文库含有一种生物的一部分基因的基因文库叫cDNA文库2、目的基因可从基因文库中获得，下列有关基因文库的描述正确的是02logo利用PCR技术扩增目的基因PCR——聚合酶链式反应是一项生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。通过此技术，可获取大量的目的基因。PCR技术原理：前提：原料方式PCR扩增仪DNA复制一段已知目的基因的核苷酸序列：以_____方式扩增，即____（n为扩增循环的次数）指数2n模板DNA；DNA引物；四种脱氧核苷酸；热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；ATP过程变性、退火、延伸三步曲变性：加热至90～95℃双链DNA解链成为单链DNA退火：冷却至55～60℃部分引物与模板的单链DNA的特定互补部位相配对和结合延伸：加热至70～75℃以目的基因为模板，合成互补的新DNA链变性退火延伸1、在遗传工程中，若有一个控制有利性状的DNA分子片段为ATGTG／TACAC，要使其数量增多，可用PCR技术进行人工复制，复制时应给予的条件是①双链DNA分子为模板②ATGTG或TACAC模板链③四种脱氧核苷酸④四种核苷酸⑤DNA聚合酶⑥热稳定DNA聚合酶⑦引物⑧温度变化⑨恒温A．①③④⑦⑨B．①④⑥⑦⑧C．②⑤⑥⑦⑨D．①③⑥⑦⑧D2、在基因工程中，把选出的目的基因（共1