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金属微电极等效电路图金属微电极测量细胞电位等效电路图:Rfa,Cωa为电极尖端与细胞内液界面的等效阻抗E(t)细胞膜电位;Ea电极尖端与组织电解液间电位;Eb参考电极和电介质间电位电极金属杆与细胞外液间由绝缘层隔开,存在分布电容Cd,总电容C=ΣCd第61页,共78页,星期六,2024年,5月金属微电极是一种除尖端外,其余部分用漆或玻璃绝缘的高强度金属细针。金属包括不锈钢,铂铱合金和碳化钨等。微电极很细的尖端通常用电解腐蚀法制作等效电路看出,金属微电极等效阻抗与频率有关。一般在几兆欧到几十兆欧,在连到电极的放大器输入阻抗不是足够大的情况下,将造成波形的低频失真,通常用金属微电极获得细胞动作电位。第62页,共78页,星期六,2024年,5月金属微电极电路图电极尖端与细胞内液间的阻抗细胞膜电位细胞内阻液电阻电极尖端与组织液间的电位参考电极与电解质电位参考电极与细胞外液间的阻抗细胞内阻液电阻第63页,共78页,星期六,2024年,5月玻璃微电极玻璃微电极又称微量吸管电极,用玻璃毛细管制作,加热拉长毛细管,使缩颈处截断成为直径1μm的微量吸管结构微量吸管中充满电解液,通常为3mol/l的KCl,再插入Ag/AgCl电极丝,然后加盖密封,配上参考电极。第64页,共78页,星期六,2024年,5月第65页,共78页,星期六,2024年,5月Rt:电极阻抗集总电容C=ΣCdE(t)细胞膜电位,Ea:电极金属与电解液间电位,Eb:参考电极和电介质间电位,Ej:尖端电位,Et:电极腔玻璃半透膜的膜电位第66页,共78页,星期六,2024年,5月特性:高阻电阻和并联电容存在,使电极对快速变化的细胞动作电位频响特性变坏。动作电位高频部分被电容旁路。造成波形失真。常采用正反馈产生负电容补偿的方法减小C的有效值。用一个实际例子说明一般玻璃微电极的频响特性第67页,共78页,星期六,2024年,5月玻璃微电极电极头直径d1=1.5μm;电极头腔内直径d2=1.0μm;颈长L=3mm;电解液电阻率ρ=2.0Ω·cm;玻璃的相对介电常数ε=1.82;ε0=8.85×10-12F/m,则电极的阻抗第68页,共78页,星期六,2024年,5月电极的颈部用同轴圆筒电容来近似,则电容:第69页,共78页,星期六,2024年,5月得到频率响应的最高限而有的细胞内电位的频率成分可高达10KHz,所以须设法减少C的值。第70页,共78页,星期六,2024年,5月玻璃微电极的负电容补偿电路:正反馈方法,负电容补偿。左边虚线部分:玻璃微电极等效电路,微电极阻抗Rt为高阻(大于50MΩ)使得输入回路时间常数很大。第71页,共78页,星期六,2024年,5月负电容补偿电路:目的是引入负电容减少电容C,使输入电路时间常数减小,高频特性改善。放大器为同相运算放大器,调节增益,从电位器W抽头引入Cf到输入端,形成正反馈电路。第72页,共78页,星期六,2024年,5月同相运算放大器增益为K,反馈增益K可以由电位器W任意调节。如果引入电容Cf以前,电容C的充电电流为第73页,共78页,星期六,2024年,5月反馈电容Cf的电流为调节反馈增益K‘使满足第74页,共78页,星期六,2024年,5月流过电容C的电流为零,C完全被电容Cf等效负电容抵消。理论上微电极等效电路没有电容,时间常数变为零,容许高频信号通过。实际补偿效果:从输出波形观测。补偿不足:波形上升沿平缓(a),补偿过头:波形上升沿过冲振荡(b),最佳补偿:(c)无失真矩形波。第75页,共78页,星期六,2024年,5月a)欠补偿(b)过补偿(c)最佳补偿第76页,共78页,星期六,2024年,5月小结1)电极组成:金属材料+电解质溶液形成的换能界面2)原理:利用电极电位(电流)随电解质离子浓度而变化。3)电极电位确定的Nernst方程4)极化现象5)极化电极和非极化电极的定义和使用6)Ag/AgCl电极工作原理和特点第77页,共78页,星期六,2024年,5月感谢大家观看第78页,共78页,星期六,2024年,5月解释当系统处于平衡状态,溶液中NaCl浓度分布是各处均匀的。电池E电压加到电极上,电极有电流通过,阴极(右)上发生电极反应为:由于产物不能扩散离开,阴极吸附氢气,成为氢电极,电极附近OH-浓度增加。第29页
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