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微生物检验的质量控制

在实际工作中存在许多复杂因素影响微生物学检验，可能给检验结果带来偏差甚至错误，因此必须对影响检验结果的诸多因素采取控制手段保证检验结果的正确性，不断完善微生物检验的质量控制。

一、质量控制

1、检验人员

(1)微生物检验不能完全依赖全自动鉴定仪器，检验工作中每一步骤均需要有高度的主观分析和判断能力，与个人的经验.技能和微生物检验基础知识水平密切相关。

(2)除要求微生物检验人员必须具备严肃认真的工作态度，精密细致的观察和操作习惯,注重个人卫生外，还必须训练掌握微生物检验技术。

(3)检验人员应执行上岗前培训制度，上岗前培训合格方能上岗操作，还要主动参加学习、培训、讲座，学习新技术，掌握微生物学检验方法，标准及相关法律法规。

(4)参与编写测试程序及仪器操作程序，学习质量保证体系知识和计量学基本知识。

(5)参加各类水平测试和盲样测试，提高检测水平和分析问题，解决问题的能力。

(6)微生物学检验室负责人应定期对检验人员进行专业知识和操作熟练程度的考核，提高检验人员的素质。

2、培养基

（1）为保证干粉培养基质量指标，在实际工作中应注意；

加强包装的密封性能；使用时尽量缩短开盖时间；一般干性培养基放在低温干燥的环境中保存，对于易受潮的品种，启用后宜放入干燥器中保存；由于配制水分不同，启用次数或时间增加，干粉培养基的pH值可能会有所变化，应随时略加调整。

（2）培养基的配制应严格按照标准规定的方法进行操作，并做好原始记录。

（3）为保证培养基必须在玻璃容器，搪瓷或铝锅中进行，如用铜，铁器皿，会对微生物生长有毒害作用；

（4）配制培养基时应按检验项目规定的配方添加，不得随意增减或更改培养基成分。

（5）要用专用的角匙取药品，避免交叉污染而影响检验结果；培养基配制最好用蒸馏水或去离子水，避免使用自来水，因其中含有氯等抗菌物质；

3、检验质量

除按国家标准方法对所需检验项目进行检测外，在实际工作中还应注意以下几个方面，否则会影响检验结果的准确性：

（1）在定量检验时用重量法还是用体积法，检验结果会有误差，因为此重不等于1的样品，1ml和1g的化验结果绝不会相等。一般固态的样品宜用重量法，液体样品宜用体积法。但对粘性液体，如用体积法，会粘附一定量的样品在吸管上，因此此类样品最好用重量法。

(2)如检样需用用无菌水或无菌生理盐水稀释，则最好用均质器或组织碎机，以8000`10000转/min的转速处理1min，制成均匀的菌悬液。

(3)样品稀释时，常会滞留少量样品在吸管内外，应多加注意。

吸入液体后，应沿管壁慢慢注入递增的稀释中，特别注意此时吸管尖端切不可碰到稀释液中。

(4)在培养基注入检样，菌悬液时，注意培养基温度宜在45℃?-50℃?之间，并使培养基与检样，菌悬液充分混合。

(5)微生物培养时，应根据要求选择正确的培养温度和时间。

二、微生物检验常用需监控的设备和仪器：

培养箱（生化培养箱或CO2培养箱等）、干燥箱、高压灭菌锅、净化工作台、pH计、冰箱，（低温冰箱或冷柜）温度计、紫外灯、显微镜、离心机、天平。

小计量容器。

微生物测定仪器、微生物检定仪器、空气采样器、酶标仪专用等。

1、高压灭菌锅的温度控制

高压灭菌锅：生物指示菌法（常用）、化学变色纸片及高压灭菌锅温度计等方法进行检测。

生物指示菌法是一种高压灭菌锅的效果显示法。

高压灭菌锅由专人按作业指导书操作，并做好每一次的作业记录。

高压灭菌锅使用时，内置物品不能太多，单位体积内的内容物（每瓶内的培养基）不能太多。同时应注意内容物不同耐受温度。总的暴露时间最好不要超过45min。

高压灭菌锅日常工作记录应包含以下信息：高压灭菌的材料、开始时间、压力/温度、取出时间、高压灭菌胶带的颜色变化（日常常用无菌培养代替）。

高压灭菌锅温度波动范围：110，115和121±2℃。

高压灭菌锅校准周期一般在半年。

2、干燥灭菌箱温度控制

干燥灭菌箱日常工作记录中应包括以下信息：开始的时间、到达灭菌温度时的时间、取出的时间（或关闭时间）。

干燥灭菌箱的温度校准；用参考温度计进行温度测试。

干燥灭菌箱温度要求与精确度：160±5℃或180?±5℃。前者为灭菌2h，后者为30min；

3、培养基配制用蒸馏水的控制

对于蒸馏水器来说：按设备说明，定期清洁离子交换器和更换离子交换材料。

检测要求：西欧标准为微生物检验用蒸馏水的特定电导率0.5ms/m；细菌数50cfu。我们的国家标准要求电导率≤25μS/cm，菌落总数不超过1000CFU/mL。

检测频率：1次/每月。

蒸馏水定点供应，并做好相应的质量控制，记录检测结果。

4、天平的管理

天平放置要求：无振动、无气流影响及水平台面上

天平要有使用及运行检查记录。

天平作为计量仪器是列入国家强制检定的范围，一般1次/年进行检定。

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