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HPLC法测定对乙酰氨基酚含量验证方案

一、设计背景

随着药品行业的快速发展，使得药检在医药在医药行业的地位占据着重要的位置。对

乙酰氨基酚是乙酰苯胺类解热镇痛药（又名“扑热息痛”），呈白色晶体或晶体性粉末，

该药品味道微苦，临床上用于治疗头痛、肌肉及关节痛等症状。对乙酰氨基酚其解热作用

与阿司匹林相似，而镇痛作用较弱，本品因仅能缓解症状，消炎作用极微，且不能消除关

节炎引起的红、肿、活动障碍，故不能用以代替阿司匹林或其他非甾体抗炎药治疗各种类

型关节炎，但本品可用于对阿司匹林过敏、不耐受或不适于应用阿司匹林的病例。是一种

非甾体解热镇痛抗炎药。

二、设计依据

通过查阅相关网站关于“对乙酰氨基酚”的相关文献资料，对乙酰氨基酚本品化学名

为N-（4-羟基苯基）乙酰胺，按干燥品计算，含量应为98.0％－102.0％；其中对其药理

的规定，抑制中枢神经系统前列腺素合成的作用与阿司匹林相似，但抑制外周前列腺素合

成作用弱，故解热镇痛作用强，抗风湿作用弱，对血小板凝血机制无影响。口服吸收迅

速，完全，在体液内分布均匀，大部分在肝脏代谢，中间代谢产物对肝脏有毒，以葡萄糖

醛酸结合物形式或从肾脏排泄，半衰期一般为1-4小时。仅对轻、中度疼痛有效。本品无

明显抗炎作用，而且它的临床效果确切，副作用较大，可见，此药物的含量测定是评定药

品的指标之一。设计对乙酰氨基酚的含量测定方法时，应当根据药品的理化性质、剂型、

处方等多方面综合考虑。根据《中国药典》2020版二部，本方案为测定准确的对乙酰氨

基酚的含量，建立了高效液相色谱法。

方案主要是借鉴了《中国药典》2020年版二部和四部通则中高效液相色谱法测定。

根据现行版中国药典规定，对乙酰氨基酚的含量测定包括：系统适用性试验、色谱条件的

确定和测定方法。

色谱条件是用AgilentC18柱（4.6mm×150mm，5μm）为填充剂；以甲醇-水（20：

80）（PH为3.0）作为流动相；柱温设置30℃；检测波长设置为244nm，流速设为1.0ml/min，

理论板数按对乙酰氨基酚峰计算不得低于4000。

三、设计方案

（一）仪器与试药

1.仪器

高效液相色谱仪（厂家：美国，型号：Waters2695）；

CQ超声波清洗器；

UV2550紫外-可见分光光度计；

玻璃棒、容量瓶、超声仪、移液管、洗耳球、烧杯、烧杯、胶头滴管、试剂瓶、

0.45μm微孔滤膜、电子天平、滤纸等。

2.试药

对乙酰氨基酚片（每片50mg）；

对乙酰氨基酚对照品（中检所提供）；

超纯水，甲醇（色谱纯），磷酸-三乙胺（色谱纯），乙腈（色谱纯）。

（二）色谱条件

1.色谱柱：AgilentEclipseXDB-C柱（4.6mm×150mm，5μm）

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2.流动相：甲醇-水（20：80）（含0.3%HP0PH=2.25）

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3.检测波长：244nm

4.柱温：30℃

5.进样量：20μl

6.流速：1.0ml/min

（三）溶液的制备

1.阴性对照品溶液的制备

取阴性对照品（不含对乙酰氨基酚）适量，置电子天平上精密称定，然后置于研钵中

研成细粉，精密称取细粉适量（约相当于对阴性对照品50mg），置100ml容量瓶中，加

流动相适量使其溶解完全，再稀释至刻度，摇匀、滤过，用移液管精密移取续滤液2ml，

置50ml容量瓶中，加入流动相稀释至刻度，摇匀，再用0.45μm的微孔滤膜过滤，取续

滤液作为阴性对照溶液。

2.供试品溶液的制备

取对乙酰氨基酚20片，去除外层糖衣膜，置电子天平上精密称定，然后置研钵中充

分研细，精密称取细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚0.8g），置于50ml的容量瓶中，加

甲醇使溶解，再加水至定容至刻度，摇匀，用0.45μm滤膜滤过，精密移取续滤溶液2mL，

置于10mL容量瓶中，再加60%甲醇稀释至刻度，摇匀，取续滤液作为供试品溶液。

3.对照品溶液的制备

称取对照品10mg，精密称定，置100mL容量瓶中，再