微生物的遗传变异与菌种选育.pptVIP

纯种的分离方法平板划线分离法菌落纯平板涂布分离法平板倾注分离法用“分离小室”进行单细胞分离细胞纯显微操纵器进行单细胞分离菌丝尖端切割法进行单细胞分离二、菌种的保藏在一定时间内使菌种不死、不变、不乱、不污染基本要求：基本原理：创造一个微生物代谢不活动、生长受抑制（休眠）环境条件（干燥、低温、真空、缺营养、添加保护剂、酸度中和剂）基本方法：生活态休眠态培养基传代培养寄主传代培养冷冻干燥斜面、半固体液氮、低温冰箱沙土管、冷冻真空干燥菌种保藏机构ATCC采用的菌种保藏法：（AmericanTypeCultureCollection，美国典型菌种保藏中心）冷冻干燥保藏法液氮保藏法CCCCM采用的菌种保藏法：（ChinaCommitteeforCultureCollectionsofMicroorganism，中国微生物菌种保藏委员会）斜面传代法冷冻干燥保藏法液氮保藏法由于微生物的多样性，不同的微生物往往对不同的保藏方法有不同的适应性，迄今为止尚没有一种方法能被证明对所有的微生物均适宜。因此，在具体选择保藏方法时必须对被保藏菌株的特性、保藏物的使用特点及现有条件等进行综合考虑。对于一些比较重要的微生物菌株，则要尽可能多的采用各种不同的手段进行保藏，以免因某种方法的失败而导致菌种的丧失。溶原性转变（lysogenicconversion）：一个与转导相似又不同的现象定义:温和噬菌体感染细胞后使之发生溶源化，因噬菌体的基因整合到宿主染色体上，而使后者获得了新性状的现象。溶原性转变与转导的不同？a）噬菌体不携带任何供体菌的基因；b）这种噬菌体是完整的，而不是缺陷的；接合(conjugation)通过细胞与细胞的直接接触而产生的遗传信息的转移和重组过程。中间平板上长出的原养型菌落是两菌株之间发生了遗传交换和重组所致！为减少所培养的结果是回复突变的机会，采用双重或三重营养缺陷型。该实验是建立在不大可能同时发生两种或三种回复突变的设想上的。细菌遗传重组单向过程和F因子的提出F－菌株F＋菌株F质粒的四种存在方式及相互关系F++F-2F+F′+F-2F′Hfr+F-多种情况Hfr+F-Hfr＋F-（多数情况下;高出几百倍以上）Hfr+F-Hfr＋Hfr（少数情况下）接合的结果F+F-F+F-F+F+F+F+起点接合管断裂进入滚环复制合成互补链分开接合管染色体DNAF因子复制起点，开始复制1条链进入复制互补链重组易断裂二、噬菌体的基因重组烈性噬菌体?噬菌体h+r-×h-r+产生的四种子裔噬菌体形成的噬菌斑透明而小半透明而大半透明而小透明而大温和性噬菌体：溶原现象。无速溶性状,寄主范围扩大寄主范围正常,但具速溶性状1.有性杂交：指性细胞间的接合和随之发生染色体重组，并产生新遗传型后代的一种方式。2.准性生殖：指两个体细胞融合，不经过减数分裂就能导致基因重组的生殖过程。菌丝联结：形成异核体：独立生活。核融合(2倍体)：10-5--10-7分离子的产生：有丝分裂过程中染色体会发生交换和单倍体化。三、真核微生物的基因重组5.4.1自然界工业菌种筛选程序5.4.2诱变育种5.4.3杂交育种5.4.4原生质体育种5.4.5基因工程技术用于工业菌种改良5.4微生物的菌种选育采样增殖培养培养分离筛选毒性试验方法、地点、时间和周围环境记录纯种分离的原则就是使培养物获得单个菌落：1．稀释平板(倾注/涂布)分离法2．平板划线分离法测定代谢产物或其它目的性状一、自然界工业菌种筛选程序目标菌数量少问题？？具体实例/如何鉴定1、步骤和方法原菌株（出发菌株）纯化细胞或孢子悬浮液诱变处理中间培养突变株分离初筛复筛生产性试验诱变预备实验活细胞计数离心收集菌体离心