DB51T 1549-2012 樱桃致死黄化病PCR检验鉴定方法.pdfVIP

ICS

DB51

四川省地方标准

DB51/T1549—2012

樱桃致死黄化病PCR检验鉴定方法

2012-12-20发布2013-03-01实施

四川省质量技术监督局发布

DB51/XXXXX—2012

目次

前言II

1范围1

2原理1

3试剂和材料1

4仪器及用具2

5田间取样2

6实验室检验3

7结果判定与记录4

8样品处理4

A5

附录(资料性附录)樱桃致死黄化病基本信息

I

DB51/XXXXX—2012

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则进行编写。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由四川省农业厅提出并归口。

本标准起草单位：四川省农业厅植物检疫站。

本标准主要起草人：万佳、宁红、谢成伦、蒋辉、吴志平、郭迪金、陈素清、余坚志、肖连康、朱

国翱。

本标准系首次发布。

IⅡ

DB51/XXXXX—2012

樱桃致死黄化病PCR检验鉴定方法

1范围

本标准规定了樱桃致死黄化病的PCR检验鉴定方法。

本标准适用于樱桃、桃树等植物的樱桃致死黄化病的PCR检验鉴定。

2原理

樱桃致死黄化病(CherryLethalYellowsphytoplasma,CLYphytoplasma)是由植原体侵染引起

的病害，主要分布于植物韧皮部筛管细胞、伴胞、韧皮纤维等。该病害通过接穗和苗木远距离传播，是

樱桃、桃树等植物上的重要病害之一。引起樱桃致死黄化病的植原体根据16SrDNA基因序列划分为榆树

黄化组(16SrV),PCR方法是检测该植原体的有效方法之一，可以快速进行樱桃致死黄化病检验鉴定。

3试剂和材料

除非另有说明，在本标准中仅使用确认的分析纯试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。试剂和

材料包括：

——灭菌超纯水(ddH₂O)。

—液氮(N₂)。

—研磨液(Grindingbuffer)4.1gKH₂PO₄,21.7gK₂HPO₄,100g蔗糖，1.5gBSA,20gPVP-10,

1000mlH₂O。

——Tris液[1M](Tris-HClbuffer)称取12.14gTris试剂，加蒸馏水1L搅拌至溶解，高压灭菌

保存。

—EDTA液[1M](EDTAsolution)称取37.224gEDTA试剂，在磁力搅拌器上剧烈搅拌，边搅

拌边加入NaOH,调pH值至8.0,加热溶解至澄清，定容1L后高压灭菌保存。

——S