2025年高考生物二轮复习大题分析与表达练7基因工程类大题突破.docxVIP

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大题分析与表达练7基因工程类大题突破

1.(2024河北卷)新城疫病毒可引起家禽急性败血性传染病,我国科学家将该病毒相关基因改造为r2HN,使其在水稻胚乳特异表达,制备获得r2HN疫苗,并对其免疫效果进行了检测。回答下列问题。

(1)实验所用载体的部分结构及其限制酶识别位点如图1所示。其中GtP为启动子,若使r2HN仅在水稻胚乳表达,GtP应为启动子。Nos为终止子,其作用为。r2HN基因内部不含载体的限制酶识别位点。因此,可选择限制酶和对r2HN基因与载体进行酶切,用于表达载体的构建。?

图1

(2)利用方法将r2HN基因导入水稻愈伤组织。为检测r2HN表达情况,可通过PCR技术检测,通过技术检测是否翻译出r2HN蛋白。?

(3)获得转基因植株后,通常选择单一位点插入目的基因的植株进行研究。此类植株自交一代后,r2HN纯合体植株的占比为。选择纯合体进行后续研究的原因是。?

(4)制备r2HN疫苗后,为研究其免疫效果,对实验组鸡进行接种,对照组注射疫苗溶剂。检测两组鸡体内抗新城疫病毒抗体水平和特异应答的CD8+T细胞(细胞毒性T细胞)水平,结果如图2所示。据此分析,获得的r2HN疫苗能够成功激活鸡的免疫和免疫。?

图2

(5)利用水稻作为生物反应器生产r2HN疫苗的优点是。(答出两点即可)?

2.基因工程抗体又称重组抗体,是指利用重组DNA及蛋白质工程技术对编码抗体的基因按不同需要进行加工改造和重新装配,经转染适当的受体细胞所表达的抗体分子。下图为某研究所制备小鼠抗甲型肝炎病毒抗体的流程图。回答下列问题。

(1)实验室构建重组质粒时,为保证目的基因与载体的正确连接,过程①最好选择的限制酶是。?

(2)在重组质粒中,目的基因首端的启动子能够,从而驱动目的基因的转录。除启动子之外,重组质粒还应该包含等。?

(3)为了筛选出导入目的基因的骨髓瘤细胞,可以在过程③的培养液中添加,过程③所获得的细胞具有的特点。?

(4)临床试验发现,过程⑤提取的小鼠抗甲型肝炎病毒抗体具有外源性,容易被人体的免疫系统清除,从而导致其治疗效果大大降低。下图抗体中的A区是与抗原特异性结合的区域,B区是引起人体免疫反应的区域。若要避免小鼠抗甲型肝炎病毒抗体被人体免疫系统清除,请提出合理的改造思路。

3.某研究小组从土壤中分离获得能分解纤维素的细菌(A菌),从A菌中提取出一种纤维素酶基因(CBHⅡ,长度为1.4kbp)并进行PCR扩增,然后与高效表达载体pUT质粒(长度约为11.7kbp)连接构建成重组质粒并导入A菌,从而获得分解纤维素能力更强的工程菌(B菌)。回答下列问题。

(1)采集土样时,可以选择树林中多年落叶形成的腐殖土,原因是。采集到的样品加无菌水稀释后(填“需要”或“不需要”)进行灭菌处理。?

(2)CBHⅡ基因两端需添加相关酶切位点才能与图1所示的pUT质粒连接,因此扩增CBHⅡ基因时需在两种引物上分别添加序列和序列。?

限制酶

识别序列及酶切位点

BglⅡ

A↓GATCT

BstEⅡ

G↓GTAACC

SacⅠ

G↓AGCTC

MspⅠ

C↓CGG

BamHⅠ

G↓GATCC

图1

(3)为了鉴定重组质粒是否构建成功,将重组质粒导入A菌,并将其接种在含的培养基中培养,然后提取3个不同菌落的质粒分别进行双酶切验证,将酶切片段和CBHⅡ基因分别进行电泳,结果如图2所示。据此分析,菌落中成功导入了重组质粒。?

图2

(4)为检测B菌的纤维素分解能力,将含有质量分数为20%的纤维素的培养基分为3组,一组接种B菌,一组不作处理,一组接种,在相同条件下培养一段时间,测定培养基中纤维素含量,结果如图3所示,说明?。?

图3

4.菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基因转入菊花,培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程图。请据图回答下列问题。

注卡那霉素抗性基因(KanR)作为标记基因,菊花叶片对卡那霉素高度敏感。

(1)质粒是基因工程中最常用的载体