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50L生物反应器实验报告（B50-24）

1.50L生物反应器工艺研究

1）实验目的

在5L、10L生物反应器实验的基础上，通过50L生物反应器进行工艺的

进一步放大和确认，以确定出更好的实验参数，供200L放大时参考、使用。

2）实验设计

根据B5-17，将其进行放大至50L生物反应器。观察其生产过程是否具有可

重复性；过程是否、稳定；产物的质和量是否符合要求。

表1：50L生物反应器实验设计表

实验代号C50-24

细胞31-2G2-31C4-4P/200M

接种密度1×106cell/ml

温度Day0-4:36.8℃;D4-D11：35.0℃

溶氧50%

搅拌转速60rpm

扩种过程(L)20ml→80ml;70ml→400ml→1500ml→14L→35L

基础培养基15.58g/LCDCHOGrow™CDDF1无培养基

+0.877g/L(6mM)L-Glutamine

补料培养基YPCellTurboFeed2+40mMN-Acytl-D-

Glucosamine+30uM

MnCl2

补料速率系数75

葡萄糖补加至如果VCD15e6cell/ml,Glc=3g/L,否则

1target

Glctarget=4g/L

培养时间11

3）实验结果

①细胞生长

从图中看出：此细胞在培养过程中的细胞数不断增加，到D8天时达到峰值，

密度为15.070e6cells/ml，第八天开始，细胞密度逐渐降低，在收获当天密度

为：10.920e6cells/ml，而细胞的活率，随着培养天数的增加逐步降低，在收获

当天为：74.30%。5L罐B5-17的细胞也是在D0-D8天迅速生长，当密度为：

14.59e6cells/ml时开始下降。下罐时，其密度为：10.25e6cells/ml；活率为：

80.9%。由此可以看出：本批50L的生长趋势与5L罐的十分相似，此次放大生

产基本成功。

图1：50L规模试验的细胞密度生长曲线

图2：50L规模试验的细胞活率曲线

②抗体产量

图3为B50-24的抗体产量曲线。抗体的产量随着培养天数的增加而逐步递

增。在收获当天，IgG的产量最高，是1.022g/L。而B50-24的平行实验

B5-17的抗体产量也是与时间成正比，下罐时，其产量最高，具体产量：

1.034g/L。从产量上来看，B5-17和B50-24相差不大，就此而言，本次放

大实验较为