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转基因小鼠技术

---转基因小鼠的构建;;优点：

外源基因整合情况的可控性高

可预先在细胞水平检测外源基因的拷贝数、定位、表达的水平及插入的稳定性

外源基因导入ES细胞的方法多样，细胞鉴定及筛选方便

缺点：

ES细胞系建立及培养困难

维持ES细胞的未分化及多向分化潜能不易

所得个体为嵌合体;4;主要是利用反转录病毒的长末端重复序列(LTR)区域具有转录启动子活性的特点,将外源基因连接到LTR下游进行基因重组后,再包装成为高滴度病毒颗粒,去直接感染受精卵或显微注入囊胚腔中,携带外源基因的反转录病毒DNA可以整合到宿主染色体上。;3、逆转录病毒感染法;优点

减少受体动物的数目,不需要用受体母畜来承担那些非转基因的胚胎,表现了强大的生命力。

事先在细胞中进行基因转移和对阳性细胞进行筛选,简化了转基因动物生产的许多环节,节约了人力,具有很大的优越性。

缺点

体细胞克隆技术近年来发展势头十分迅猛,但在基础理论和实验技术上还需进一步探索。;5、精子载体法;优点

基因转化方法简便,效率高

动物育种不经过嵌合体,实验周期短

缺点

目的基因整合的随机性

无法早期验证修饰事件

成功率不高、效果不稳定;6、YAC法（人工酵母染色体法）;7、BAC法（人工细菌染色体法）;方法;;电击仪;17;18;19;1;1;;23;24;转基因小鼠技术

---转基因小鼠在科研中的应用;1.7500万－1.25亿年前--人鼠始祖;;ClarenceCookLittle是一个来自于WilliamCastle实验室的哈佛大学生物学家，他培育出了第一个近亲繁殖的小鼠株系――DBA。;8.1921年--C57BL株系;10.1953年--DNA双螺旋;12.1972年---小鼠遗传学的计算机数据库;16.1987-89年--第一只基因敲除小鼠;19.1999年--小鼠基因组测序协会;22.2002年5月--16号染色体与已被分析的人类 21号染色体序列高度相似;转基因小鼠技术的应用;基因表达调控、基因功能及发育调控作用的研究;基因工程定向育种;转基因动物生物反应器研制;乳腺生物反应器具有以下特点：

⑴乳腺是自我封闭系统，乳腺表达的蛋白质不回流到血液循

环系统，避免外源基因表达的蛋白质对动物本身的影响；

⑵乳腺组织是一种有效的蛋白质合成器??

一头奶牛一年可生产乳蛋白250—300Kg，一只绵羊或山羊 一年可生产乳蛋白25—30Kg。如果有百分之一的乳蛋白代 换成医用蛋白，产量十分可观。

⑶乳腺分泌的基因产物不但产量高，而且易提纯。表达的蛋

白经过充分的修饰加工，具有稳定的生物活性。生物活性

接近天然产品；

⑷在动物乳腺表达的外源基因可以遗传，可用常规技术繁殖

生产群体。;转基因动物生物反应器研制;人类疾病小鼠模型与基因治疗;药理学研究;器官移植;环境科学研究;转基因小鼠技术的主要问题;46;参考文献;参考文献;作业;