病原生物与免疫学：免疫学应用PPT教学课件.pptx

第九章免疫学应用

学习目标1.掌握免疫学检测的原理、抗原-抗体反应的特点及影响因素。2.熟悉凝集反应、沉淀反应的种类、免疫标记技术的种类和原理。3.了解T细胞功能的体内检测方法及临床意义、人工主动免疫与人工被动免疫的区别、用于免疫预防的常用生物制品、计划免疫的程序、临床常用的免疫学治疗制剂。

第一节免疫学诊断

第一节免疫学诊断当我们身体被病菌或其他有害物质（我们称之为“病原微生物”）攻击时，我们的身体会产生特殊的“武器”来对抗它们。这些“武器”可以是特定的体液（如抗体）或特殊的细胞（如免疫细胞）。医生通过检测这些“武器”来辅助诊断疾病，这叫做免疫学诊断。免疫学检测技术是一种科学的方法，它利用了很多其他学科的知识，比如生物学、分子学等，来帮助医生了解我们体内的“武器”数量、功能以及它们的状态。这种方法可以帮助医生判断我们是否得了某种传染病，或者我们的免疫系统是否健康，甚至预测疾病的发展情况。在医学上，这种检测技术不仅用来诊断传染病，还可以用来诊断肿瘤、过敏、自身免疫疾病等，甚至可以用来检测我们体内的某些蛋白质、激素和药物。总之，免疫学检测技术是医生的好帮手，它让医生能够更准确地了解我们的身体状况，从而给出更好的治疗方案。

一、抗原或抗体的检测抗原与抗体的结合在机体内可表现为中和细菌毒素、溶解细胞、杀菌、促进吞噬或引起免疫病理损伤等反应;在体外,由于抗原与抗体结合的物质基础是抗原的表位和抗体可变区的空间构型的互补性。因此,在一定条件下,抗原和相应抗体在体外结合可出现肉眼可见的凝集、沉淀、补体结合等多种反应。通过对这些反应结果的分析,临床工作者可对抗原或抗体进行鉴定。抗体主要存在于血清中,临床上多用血清标本进行试验,故体外的抗原-抗体反应曾被称为血清学反应,但随着单克隆抗体技术等免疫学技术的深入发展,血清学反应的含义已被抗原-抗体反应这个概念(抗原与相应抗体之间的特异性结合反应)所取代。

国内四种抗蛇毒血清抗蛇毒血清是用蛇毒少量多次注射动物后，动物产生的抗体经提纯而成

(一)抗原-抗体反应的特点01抗原与抗体结合高度特定，基于互补的表位和超变区，通过氢键、疏水力和静电力等结合。这种特异性在传染病诊断等领域广泛应用，并存在交叉反应的可能性。1.特异性02抗原与抗体结合能否肉眼可见取决于其比例。合适比例下形成大分子复合物可见，过剩则难以观察。需稀释以获得可见结合现象。2.可见性03抗原与抗体结合为非共价键结合，可在特定条件下解离，且解离后保持原性质。3.可逆性

(二)影响抗原-抗体反应的因素1。温度适宜的温度可增加抗原与抗体分子接触的机会,缩短反应时间,通常为37℃。2.酸碱度pH过高或过低均可影响抗原、抗体的理化性质,因此,抗原-抗体反应需要合适的pH溶液,其最适宜的溶液pH为6~8。3.电解质抗原和抗体都有相应的极性基团,能相互吸附并由亲水性变为疏水性。电解质可使抗原-抗体复合物失去电荷而发生凝集,出现可见反应;若无电解质的参与,则不出现可见反应,故免疫学试验中常用生理盐水稀释抗原或抗体。可影响抗原-抗体反应结果的因素

(三)常见的抗原-抗体反应类型

1.凝集反应细菌或细胞等颗粒性抗原与相应的抗体结合时,在适宜电解质存在的条件下可形成肉眼可见的凝集物,即凝集反应(图9-1)图9-1各种凝集反应

2.沉淀反应可溶性抗原(如血清蛋白质、组织浸出液、细菌裂解液等)与相应抗体结合后,在一定条件下可形成肉眼可见的沉淀物,称为沉淀反应。该反应可在半固体琼脂中进行,也可在液体中进行。目前,常用的沉淀反应方法主要有单向琼脂扩散试验、双向琼脂扩散试验、对流免疫电泳、免疫比浊法四种。图9-2单向琼脂扩散

(2)双向琼脂扩散试验:将抗原和抗体分别加入琼脂板的不同孔中,两者可同时在琼脂中向周围扩散,在相遇处形成白色沉淀线(图9-3)图9-3双向琼脂扩散

(3)对流免疫电泳:在双向扩散的基础上进行的电泳。图9-4对流免疫电泳

3.免疫标记技术免疫标记技术是指用荧光素、酶、放射性核素、发光剂或电子致密物质,如铁蛋白、胶体金等作为示踪剂标记抗体或抗原进行的抗原-抗体反应。根据实验中使用的标志物与检测方法,免疫标记技术可分为免疫荧光技术(immunofluorescencetechnique)、免疫酶标技术(immunoenzymatictechnique)、放射免疫测定(radioimmunoassay,RIA)和免疫胶体金技术等。(1)免疫荧光技术:用荧光素标记抗体或抗原,测定待检标本中有无相应抗原或抗体的方法。常用的荧光素有异硫氰酸荧光素(FITC)、罗丹明(RB200),常用方法包括直接法和间接法。1)直接法:应用特异性荧光抗体直接检测标本中的抗原,在荧光显微镜下观察结果,发荧光的部位有相应的抗原存在。2)间接法:先使标记的