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汇报人：文小库2024-12-19病理组织切片图制作步骤

目录CONTENTS准备工作组织处理过程切片制作技巧染色方法及注意事项封片与保存方法质量控制与评估标准

01准备工作

用于对切片进行漂洗和烘干。漂烘仪用于对切片进行染色。染色于将组织样本切成薄片。切片机用于观察染色后的切片。显微镜实验室设备准备

用于切割组织样本。切片刀试剂及耗材准备用于将切片粘附在载玻片上。粘片剂用于对切片进行染色。染色剂用于封固切片，防止染色剂脱落。封片剂

样本收集从患者体内或体外收集需要检测的组织样本。样本固定使用适当的固定剂将组织样本固定，以保持其形态和细胞结构。组织样本收集与固定

02组织处理过程

使用不同浓度的酒精溶液对组织进行脱水，以去除组织中的水分。酒精脱水丙酮脱水速度快，但容易使组织变脆，常与酒精配合使用。丙酮脱水脱水时间需根据组织类型和大小进行调整，避免过度脱水或不足。脱水时间脱水处理010203

常用的透明剂有二甲苯、苯等，可逐渐替代组织中的酒精，使组织变得透明。透明剂选择透明时间透明温度透明时间不宜过长，以免组织变质，一般需控制在1-2小时。透明温度需适宜，过高过低都会影响透明效果。透明化处理

浸蜡过程将透明后的组织放入熔化的石蜡中，使其逐渐浸透到组织内部。浸蜡温度浸蜡温度需适宜，过高会使组织变硬，过低则石蜡无法充分渗入。包埋操作将浸透石蜡的组织放入模具中，加入融化的石蜡进行包埋，冷却后形成蜡块。蜡块处理将蜡块修整成合适的形状和大小，以便切片和染色。浸蜡与包埋操作

03切片制作技巧

01切片机的选择根据组织类型和硬度选择适合的切片机，确保切片质量。切片机的使用方法02切片操作将组织块放置于切片机上，调整刀片角度和位置，以均匀、平稳的速度进行切片。03切片机的维护与保养定期清理切片机，更换刀片，确保其处于良好工作状态。

根据实验需求和染色方法，选择合适的切片厚度。切片厚度的选择通过调整切片机参数，确保每个切片的厚度均匀一致。厚度均匀性根据不同组织的特点，尝试不同的切片厚度，找到最佳的观察效果。厚度优化切片厚度调节与优化010203

防脱片剂的选择根据组织类型和实验需求，选择合适的防脱片剂。防脱片处理在切片过程中，将防脱片剂均匀涂抹在载玻片上，确保切片牢固粘附。干燥与保存切片后，将载玻片置于干燥处，避免受潮，同时避免阳光直射和高温环境，以防切片脱落或变质。防脱片处理措施

04染色方法及注意事项

常规染色方法介绍苏木素-伊红染色法（HE染色）用于常规组织切片染色，苏木素主要使细胞核着色，伊红使细胞质和胞外基质着色。免疫组织化学染色法（IHC）利用特异性抗体与组织中的抗原结合，通过化学反应使标记物显色，用于检测特定蛋白质或抗原。原位杂交技术（ISH）使用标记的核酸探针与组织中的靶序列杂交，用于检测特定基因或mRNA的表达。

免疫荧光染色利用化学反应检测组织中的特定化学成分，如糖类、脂类、酶等。组织化学染色嗜银染色用于检测组织中的嗜银物质，如嗜银细胞、嗜银颗粒等。利用荧光素标记的抗体检测组织中的特定抗原，通过荧光显微镜观察。特殊染色技术应用

染色不均可能由于染料浓度不均、切片厚度不一或染色时间不当导致，可以通过调整染料浓度、切片厚度和染色时间来解决。染色过程中常见问题及解决方案染色过深或过浅染色过深可能是由于染色时间过长或染料浓度过高，染色过浅则可能是染色时间过短或染料浓度过低，可以通过调整染色时间和染料浓度来解决。切片脱片可能是由于切片过薄、粘片不当或处理过程中脱水不彻底导致，可以通过改进切片技术、增加粘片力度和加强脱水处理来解决。

05封片与保存方法

封片技巧封片时要避免产生气泡，同时应确保切片被完全覆盖，封片后还需用显微镜观察是否有封片不良或切片移动等问题。中性树胶封片在组织和盖玻片之间滴入中性树胶，能够防止切片受到空气和湿气的侵蚀。树脂封片常用的树脂有环氧树脂、丙烯酸树脂等，具有封片效果好、不易脱落等优点，但成本较高。封片剂选择及封片技巧

切片应保存在干燥的环境中，避免受潮和霉变。干燥环境切片应避免阳光直射，以免切片褪色或变质。避光存放切片保存的温度应适中，过高或过低都不利于切片的保存。适宜温度切片保存环境要求010203

真空包装将切片放入真空包装袋中，排除空气和湿气，可以延长切片的保存时间。长期保存策略和建议切片数字化将切片进行数字化处理，保存为电子图像，可以避免切片因年代久远而褪色或受损。定期检查长期保存的切片应定期检查，如有褪色、变质等情况应及时处理，以免影响后续的观察和研究。

06质量控制与评估标准

切片厚度切片应薄而均匀，厚度应在3-5微米之间，以便于染色和观察。切片完整性切片应完整，包含组织中的所有细胞和结构，无破碎或断裂。切片清洁度切片应无杂质、无污染、无气泡，保证染色效果和观察效果。切片平整度切