生物化学实验的基本操作.pdfVIP

英雄者，胸怀大志，腹有良策，有包藏宇宙之机，吞吐天地之志者也。——《三国演义》

一、玻璃仪器的使用及清洁

（一）玻璃仪器的洗涤及干燥

1、一般仪器：烧杯、试管、离心管等普通玻璃仪器，可直接用毛刷蘸餐洗净刷洗，然后用自

来水冲洗，直至容器内不挂水珠即可。最后用少量蒸馏水冲洗内壁2－3次，倒置晾干即可。

2、容量分析仪器：容量瓶、滴定管及吸管等容量仪器，用后用自来水多次冲洗，如能清洁（壁

不挂水珠），再用蒸馏水少量冲洗2~3次晾干即可备用。若仍不干净附有油污等，则须于干

后放入铬酸洗液内浸泡数小时，然后倒净（或捞出）洗液，用自来水充分冲洗至水不显黄色

后再冲几次，最后用少量蒸馏水冲洗2~3次晾干备用。

在做酶学实验时，对仪器的清洁要求更高，因如有极微量的污物（如重金属离子）即可导致

整个实验失败。因此，必要时仪器经上述方法洗涤后，还需用稀盐酸或稀硝酸洗涤，以除去

铬及其它金属离子，然后再用自来水、蒸馏水冲洗。生化实验室常用的洗液有以下几种：

（1）铬酸洗液：为最常用的洗液，由重铬酸钾、粗硫酸及水配制而成，去污力强，清洗效果

好。其配制方法有多种，可根据需要进行选择，常用的配方如下表。

重铬酸钾（ｇ）10060100

水（ｍｌ）750300200

粗硫酸（ｍｌ）250460800

清洁性能较弱较强（常用）最强

配制方法为：先将重铬酸钾溶于水，再慢慢加入浓硫酸。因配制过程产生大量热，容器需放

入冷水中，边加硫酸边搅动混合。由于产热量很大，使用玻璃容器有破裂的危险，所以最好

用耐高温的陶瓷或耐酸的搪瓷容器。洗液可多次反复使用，如效力变弱，可加入少量重铬酸

钾及浓硫酸继续使用，但如果变为绿色，则不宜再用。

（2）10%尿素液：为蛋白质良好溶剂，帮适用于洗涤盛血的容器。

（3）草酸盐液：用于清洗过锰酸钾的痕迹。

（4）硝酸液：用1：1的硝酸水溶液，用于清洗CO2测定器及微量滴定管。

（5）乙二胺四乙酸二钠（EDTA－Nａ2）液：5~10%的EDTA－Nａ2液可用于洗涤器皿内无机盐

类。

玻璃仪器的干燥方法可根据不同仪器的种类而定。一般地说洗净后的玻璃仪器，如不急用应

倒放在晾架上令其自然干燥。若有急用可放在烘烤箱中烤干，但容量玻璃仪器，如容量瓶、

吸量管、滴定管以及烧结、结构复杂的玻璃仪器等，严禁烘烤。此类仪器，如急用可采用水

泵抽气法干燥。

（二）常用玻璃仪器的使用

1、吸量管：吸量管是用来测量一定容积的液体，并把它从一个器皿转移至另一个器皿中的量

器。常用的吸量管有以下几种：

（1）刻度吸量管：刻度吸量管是多刻度吸量管，有0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0

毫升等规格。吸量管刻度所标的数字有自上而下和自下而上两种，使用之前应仔细分辨。实

验室所用之刻度吸管多属于刻度到尖端的吸管，所以要吹出尖端留存的液体。

（2）奥氏吸管：在量取粘度较大的液体如血液、血清等时，应当使用奥氏吸管。这种吸管也

是单标的，并且在其下端有一个膨大部分。所以液体与吸管表面接触面积较小，当量取血液

时，较他种吸管准确。奥氏吸管的容量包括遗留在尖端的液体，故在缓缓使液体流出后，再

停留数秒钟，吹出最后一滴。在学生实验中常用的有1、2、5毫升等规格。

英雄者，胸怀大志，腹有良策，有包藏宇宙之机，吞吐天地之志者也。——《三国演义》

吸量管使用法：使用吸量管时，用拇指和中指靠近顶端部分。将管的下端插入液体里，用吸

球吸入液体至需要刻度的标线上1~2厘米处（插入液面下的部分不可太深，以免管的外壁沾

附的溶液太多；也不可太浅，防止空气突然进入管内，将溶液吸入吸球内），将已充满液体

的吸量管提出液面，用小片滤纸揩去管外沾附的溶液，把吸管提到与眼睛在同一水平线上。

然后小心松开上口，按所需要液体容积缓缓自由流出。最后再根据规定吹出或者不吹出