基因组的结构与功能.pptVIP

AmproripUC18(3kb)MCS(Multiplecloningsites, 多克隆位点）LacpromoterlacZ’…ACGAATTCGAGCTCGGTACCCGGGGATCCTCTAGAGTCGACCTGCAGGCATGCA….ThrAsnSerSerValProGlyAspProLeuGluSerThrCysArgHisAlaSer…EcoRISacIKpnISmaIXmaIBamHIXbaISalIHincIIAccIPstISphILacZTheORFoftheinsertedgenehastobeinthesamedirectionasthatofthelacZAfusionproteincontainstheN-terminalsequenceoflacZandtheinsertedORFwillbeproducedAmpicillinresistant?yesyesTetracyclineresistant?NoyesBXBBBXAmproriAmprTcroriAmprTcroripBR322B抗性基因的插入失活以筛选重组质粒质粒的遗传控制1复制调控系统：由复制起点（ori)、rep基因、cop基因组成，控制质粒的拷贝数；2分配系统:使质粒在细菌分裂过程中精确分配到子细胞中；3细胞分裂系统：抑制细胞分裂，使细胞分裂与质粒复制协调；4位点特异重组系统：由质粒att位点、质粒编码的Int和Xis酶、宿主FIS组成，将高拷贝质粒形成的多聚体拆开成单体，便于平均分配；5质粒的不相容性：具有相同复制起始位点和分配区的两种质粒不能共存于一个宿主菌。质粒的类型严谨型和松弛型质粒：分别为低拷贝数和高拷贝数质粒。窄宿主谱及广宿主谱质粒：窄宿主谱质粒存在于一种或数种密切相关的宿主（如ColE）；广宿主谱质粒可在不同科、属、种细菌间传递（如pC194）。接合型质粒、可移动型质粒和自传递质粒：接合型质粒只能使细菌接合；可移动型质粒可被传递；自传递型质粒兼具上述两种质粒的功能（如F质粒）。细菌基因组学研究及意义细菌基因组学是测定细菌全基因组序列，把细菌全基因组序列的知识和分析序列的情报工具结合起来，研究细菌的毒力和致病性的一门科学。更好地了解病原微生物的致病机制；加快重要致病基因的发现速度；寻找病原菌特异的DNA序列，提高临床诊断的效率和准确性；为筛选有效药物及发展疫苗提供参考。第四节真核生物基因组更加复杂一、真核生物基因组远大于原核生物基因组真核生物（eukaryote）基因组的容量远远大于原核生物基因组，真核基因组的结构与功能更为复杂。人的单倍体基因组DNA约为3.3x109bp，大肠杆菌的基因组只有4.6x106bp。二、真核生物基因组由染色体DNA和染色体外DNA组成添加标题真核生物细胞具有细胞核，DNA为线状，与组蛋白、非组蛋白结合成染色质。添加标题除细胞核基因组外，真核生物还具有线粒体基因组，在植物细胞中的叶绿体内也有遗传物质。三、真核生物基因组的结构特点每一种真核生物都有一定的染色体数目，除配子（精子和卵子）为单倍体外，体细胞一般为双倍体，即含有两份同源的基因组。01真核基因组远远大于原核生物基因组，结构复杂，基因数庞大，具有许多复制起始点，每个复制子大小不一。02真核基因都由一个结构基因与相关的调控区组成，转录产物为单顺反子（monocistron），即一分子mRNA只能翻译成一种蛋白质。03真核生物含有大量重复顺序。04真核生物基因组内非编码序列（non-codingsequence，NCS）占90％以上。真核基因是断裂基因（splitgene），即编码序列被非编码序列分割开来，基因与基因间的非编码序列为间隔DNA（spacerDNA），基因内非编码序列为内含子，被内含子隔开的编码序列则为外显子。功能相关的基因构成各种基因家族，它们可以串联在一起，亦可相距很远，但即使串联在一起的成簇的基因也是分别转录的。真核生物基因组中也存在有一些可移动的遗传因素（mobilegeneticelements）。内含子、启动子假基因基因片段非编码序列90％编码序列10％结构基因及其相关序列20％－30％SINEs