内分泌系统和代谢.pptVIP

造模原理链脲佐菌素结构中的亚硝基脲具有细胞毒作用，去氧葡萄糖部分使之易于进入胰岛B细胞。STZ通过自由基（过氧化物和羟基）选择性损伤胰岛B细胞，从而造成胰岛素缺乏，诱发动物糖尿病。一次注射较大剂量STZ可致B细胞坏死而无胰岛炎，而用小剂量STZ连续给动物注射，可产生胰岛炎及糖尿病。实验动物STZ可在大鼠、小鼠、犬和猴等动物引起糖尿病，较常用的实验动物为大鼠(180～220g)和小鼠。主要试剂STZ，用冷的pH4.0～4.20.1mol/L的柠檬酸盐缓冲液配成2%的溶液（**现用现配）。大鼠禁食12~16h，不禁水。01STZ50mg/kg体重，单次腹腔注射，对照组动物腹腔注射等体积0.1mol/L柠檬酸盐缓冲液。02操作步骤注射STZ后24h~48h，尿糖试纸测尿糖，应在3+及以上，必要时切去尾尖取血测定血糖浓度。1周后糖尿病大鼠表现多饮、多食、多尿和体重明显减轻，再次测定尿糖，尿糖在3+及以上、血糖值≥16.67mmol/L者列入糖尿病动物。造模方法大鼠制备糖尿病模型以STZ50mg/kg体重，腹腔注射为适宜。模型特点此模型类似人类I型糖尿病，是目前国内外应用最多的糖尿病动物模型。注射STZ后，血糖变化可分3个时相：短暂高血糖相（注射STZ后1~4h）；低血糖相（6~12h）；稳定高血糖相（注射STZ后24h）。*注意事项短暂高血糖相B细胞急剧受损，分泌至血中的胰岛素明显下降。01低血糖相受累B细胞将贮存的胰岛素突然释放入血。*为减少注射STZ后低血糖的危险，于STZ注射后4h或立即腹腔注射25%葡萄糖溶液2ml。02稳定高血糖相B细胞受损，合成胰岛素减少。03STZ常用的给药途径以静脉和腹01腔注射最常用。02注意事项STZ诱发糖尿病的剂量与动物种01类、品系、年龄和性别有关。一02般雄性、成年和体重大的大鼠成03模率比较高。动物状态、性别亦04应注意。05注意事项STZ纯品为结晶粉状，在室温下和01冷藏室内不稳定，须放置－20℃或－70℃长期保存。其水溶液应在pH4.0，低温保存，用前现配。一般用柠檬酸盐缓冲液配制成1%~2%浓度，该溶液呈透明、微黄色。02注意事项注意事项关于成模标准血糖值≥11.1～16.67mmol/L作为糖尿病大鼠空腹或非空腹的成模标准。因有的动物在糖尿病成模后有自发缓解现象，主张注射STZ后1周测定血糖，确定模型复制是否成功。01降血糖药物具有刺激胰岛素分02泌作用者，不宜选用STZ或下述四03氧嘧啶诱发的高血糖动物模型，应04在正常动物或自发性糖尿病动物进05行研究。注意事项注意事项小鼠或大鼠在形成高血糖30d后，少数动物的高血糖有所缓解，这是由于动物的胰腺腺泡细胞增殖并转变为B细胞所致。注意事项对于血糖过高的动物可皮下注射长效胰岛素2U，使血糖控制在16.7～22.2mmol/L，维持体重，降低死亡率。（三）四氧嘧啶诱发糖尿病模型同STZ致糖尿病。实验原理大鼠、小鼠、兔、犬、猫和猴等。实验动物实验试剂四氧嘧啶，用注射用水或生理盐水新鲜配制成1%~3%的溶液。大鼠禁食12h后按四氧嘧啶30~40mg/kg体重尾静脉或舌下静脉1次性注射。18h后出现持续性高血糖伴多饮、多尿等症状，随后血糖达16.67mmol/L以上，稳定2周后可作为糖尿病模型。特点：节省药物，成模率高，但技术要求高。方案1：一次小剂量静脉注射大鼠禁食12h后，将新鲜配制的四氧嘧啶溶液按150~200mg/kg体重1次腹腔注射，24h后血糖值≥16.67mmol/L，持续2周以上可选作糖尿病模型。特点：成模率尚可，但部分动物在三周内可自然缓解。12方案2：一次大剂量腹腔注射01大鼠禁食12h后，第1d将新鲜配制的四氧嘧啶溶液按120mg/kg体重腹腔注射，第2d大鼠禁食12h后再按100mg/kg体重腹腔注射。02特点:成模率高，缓解率低，死亡率比腹腔注射200mg/kg体重明显降低。方案3：二次中剂量腹腔注射方案4：小鼠大剂量腹腔注射成年小鼠禁食12h后，将新鲜配制的四氧嘧啶溶液按200mg/kg体重1次腹腔注射，24h后血糖值≥16.67mmol/L，持续2周以上可选作糖尿病模型。1四氧嘧啶与STZ所致糖尿病的特征基本相同。血糖的变化也分为三个时相。2多种给药途径，最常用的是静脉注射。动物注射前应禁食，注射应在30S内完成，注射越快越容易引起糖尿病。3四氧嘧啶溶液pH7.0时须保存在4℃以下（半衰期≥