生物学实验3-细胞ppt课件.pptxVIP

基础生物学实验三;实验一

普通光学显微镜的结构和使用;【实验目的】

了解普通光学显微镜的构造及原理，熟练掌握其操作方法；

了解人血与蛙血细胞的形态差异。;【实验原理】

显微镜种类：

显微镜的组成系统：光学、机械、电子。

普通光镜的光学系统：物镜、目镜、聚光器、光阑等。

普通光镜的机械系统：镜筒、镜臂、物镜转换器、调焦螺旋（粗调和细调）、载物台、镜座等;【实验步骤】

A：显微镜的使用

取用显微镜时，右手握镜臂，左手托镜座，避免倾斜；

接通电源，打开光圈，上升聚光器；

标本片置于载物台上，材料对准通光孔；

低倍下调焦；

选择合适区域推到中央，换高倍镜调焦（细调）；

观察绘图；

结束时将显微镜复原到非工作状态。;显微镜使用的注意点：

禁止单手提拿显微镜和随意拆卸零部件；

低倍下调焦时先上升载物台（或下降镜筒），再缓慢下降载物台或上升镜筒，使物镜镜头与玻片距离由小到大调焦。一般直接转换成高倍镜后细调焦距；

观察标本时两眼同时睁开；

调节合适的光圈和电流强度可使成像更清晰；

如果使用100×油镜，应在标本上滴一滴香柏油，使镜头底端与该介质接触。观察完后及时用二甲苯擦拭油镜头。注意其它镜头不得接触香柏油。;【实验目的】

掌握光镜下多种细胞的形态和结构特征；

掌握显微测微尺的使用和测量细胞大小的方法。;【实验原理】

动物各种不同组织的细胞具有不同的形态大小等特征;单层柱状上皮与复层扁平上皮;骨骼肌细胞与心肌细胞;平滑肌细胞

;神经元

肝细胞;【实验原理】;【实验步骤】

A.分别观察肠上皮细胞、骨骼肌细胞、心肌细胞、神经细胞和肝细胞等切片，注意比较鉴别细胞的形态结构，核形态数量和位置等特征。

B.蛙血细胞大小的测量

1.蛙血涂片的制备

2.目镜测微尺的标定

3.细胞大小的测量;【作业】

1.绘图：各种细胞的形态结构

2.记录5个以上的蛙血细胞的长、短径，得到平均细胞大小;实验三

细胞器的显示与观察;【实验目的】

了解光镜下细胞器的形态和分布

掌握超活染色法制作光镜标本的基本方法;【实验原理】

活体染色是能使活???细胞或组织着色且无毒害的一种染色方法。可用于研究生活状态下的细胞形态结构和生理或病理变化。

活体染料被特异性地固定和堆积在细胞内某种细胞器上而显色。活体染色分为体内活染和体外活染（超活染色）。

詹纳斯绿B是毒性较小的碱性染料，可专一性地对线粒体进行超活染色。其原理是由于线粒体内细胞色素氧化酶系的作用，使JGB保持氧化状态，呈亮绿色；而周围的细胞质中染料被还原为无色的色基。;【实验步骤】

人口腔上皮细胞线粒体的超活染色与观察

用牙签刮取口腔颊部粘膜的上皮细胞，在洁净的载玻片上与1dJGB染液混匀，染色15min以上。盖上盖玻片，光镜下观察线粒体的形态和分布。

B.小鼠肝脏细胞线粒体的超活染色与观察

取小鼠肝脏边缘较簿组织，置于含Ringer液平皿中挤压洗涤2-3次，吸去Ringer液，加JGB染液染色30min，Ringer液洗涤1次后转移至载玻片，将组织拉碎，去稍大的组织块，盖上盖玻片，镜检。

C.高尔基复合体标本的观察

兔脊神经节切片

D.动物细胞中心体标本观察;【作业】

绘图：人口腔上皮细胞（显示线粒体）

小鼠肝细胞（显示线粒体）

兔脊神经节细胞（显示高尔基体）

;实验四

细胞膜的通透性;【实验目的】

掌握细胞膜的选择通透性和细胞内外水分子交换的原理。;【实验原理】

细胞与周围环境之间可进行选择性物质交换。水分子通常以简单扩散的方式通过细胞膜，如果细胞内外存在渗透压差时，水分子表现从渗透压低的一侧向高的一侧扩散。将红细胞置于低渗溶液中，溶剂很快进入细胞内，发生溶血，释放出血红蛋白，重新封闭的红细胞膜构成血影。而在高渗溶液中，动物细胞发生脱水皱缩。

将红细胞置于数种等渗溶液中，由于红细胞膜对各种溶质的通透性不同，有的不能通过，能通过的溶质通过的速度也有差异。随着溶质的进入，红细胞内渗透压提高，带动水分的摄入，最终引起溶血。通过溶血时间的测定可估计红细胞膜对各种溶质通透性的大小。;【实验步骤】

1、制备10％兔红细胞悬液：兔心脏抽血，加肝素抗凝，加等渗氯化钠稀释10×成不透明的悬液。

2、在1支试管加5ml蒸馏水，再加0.5ml10％红细胞悬液，观察溶血现象的发生。

3、10支试管分别加5ml不同的等渗溶液，再加0.5ml10％红细胞悬液，观察溶血现象是否发生，记录溶血发生时间。

4、显微镜下观察红细胞血影。;等渗溶液;植物细胞骨架的光学显微镜观察;【实验目的】

掌握考马斯亮蓝法检测细胞骨架的方法;【实验原理】

A.细胞化学染色与DNA和RNA的定位

核酸分为DNA和RNA，呈酸性可与碱性染料反应而