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２．聚合物在蛋白质分离中的应用蛋白质是由氨基酸通过酰胺键连接而成的高分子，两性，存在等电点，因其空间结构的复杂性，有亲水或疏水之分。
蛋白质在低于等电点时会带上正电荷，在高于等电点时带负电荷．若缓冲溶液的pH值低于蛋白质等电点，蛋白质则吸附H＋而带正电荷，由于静电相互作用，蛋白质与管壁发生吸附。
（a）碱性蛋白质（pI＝8）所带电荷量随pH的变化曲线；（b）在pH＝4时，碱性蛋白质（pI＝8）与毛细管壁发生吸附
１.极端pH值法
pH高于蛋白质的pI时，毛细管内壁对蛋白质产生静电排斥抑制吸附，但是，蛋白质存在的自然状态为pH4－10，高pH如11.0时，容易使蛋白质变性或者水解。pH小于1.5（熔融硅或石英的等电点）时，蛋白质的质子化导致其质荷比差别较小，分辨率难以提高。对等电点相近的蛋白质不易实现分离。一般认为，使蛋白质混合物分离的首选pH值应和蛋白质混合物的pKa值基本一致。McManigillD.AnalChem,1986，58：166～170.
(2)物理吸附的毛细管涂层目前使用的聚合物：中性的聚合物－已经广泛用于DNA和其它一些生物大分子的分析，但是由于蛋白质的吸附作用，使得对蛋白质的分析仍有一定难度。亲水性的聚合物－如甲基纤维素，聚糖等不能很好的吸附在管壁上，稳定性差。带疏水基团的聚合物－聚乙烯基吡咯烷酮，聚N,N-二甲基丙烯酰胺可以形成稳定的涂层，但是由于疏水基团与蛋白质之间的相互作用使得分离效率下降。MadabhushiRS.Electrophoresis，1998，19：224～230.VerzolaB,GelfiC,RighettiPG.JChromatogrA，2000，874：293～303.
羟乙基纤维素的改性
Formationofthecat-HECSchematicdiagramofadsorptionofcat-HEContosilicasurface.(1)Cat-HECNo.HEC(g)Glycidyltrimethylamminiumchloride(g)Viscosity(mp.s)Nitrogencontent(%)Cat-HEC-110.02.53800.8Cat-HEC-210.05.03751.3Cat-HEC-310.07.53701.7PreparationandpropertiesofCat-HEC
ElectroosmoticflowasafunctionofpH.Comparisonbetweenabarefused-silicacapillary,HECandcat-HECcoatedcapillaryElectropherogramsofamixtureofstandardproteins.Separationswerecarriedoutusingcat-HEC-2coatedcapillary1=Lysozyme;2=CytochromeC;3=RibonucleaseA.ElectropherogramsofamixtureofstandardproteinsatpH4.6.
ProteinBarecapillaryN(plate/m)bHECN(plate/m)RSD(%)Cat-HEC-2N(plate/m)RSD(%)CytochromeC93001040003.521860000.86Lysozyme--1620002.452650000.85RibonucleaseA173001800003.562820000.96Electrophoresis,2008,29,1460-1466.ElectropherogramsofamixtureofstandardproteinsindifferentpH.Separationswerecarriedoutusingcat-HEC-2coatedcapillary1=Lysozyme;2=CytochromeC;3=RibonucleaseA.Migrationtimereproducibility(n=3)andpeakefficiencyofproteinsseparatedinpolymer-coatedcapillariesatpH4.6
(２)HEC-g-P4VPFormationoftheHEC-g-P4VPElectroos
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