DB12T 884-2019 百合鳞茎中多糖的含量测定 紫外可见分光光度法.docxVIP

ICS65.020.20B04

DB12

天津市地方标准

DB12/T884—2019

百合鳞茎中多糖的含量测定紫外/可见分光光度法

DeterminationofpolysaccharideinLilyBulbus-UV/VISspectrophotometry

2019-03-15发布2019-05-01实施天津市市场监督管理委员会发布

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DB12/T884—2019

前言

本标准依据GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由天津市农业科学院提出并归口。

本标准起草单位：天津市农业质量标准与检测技术研究所。

本标准主要起草人：刘征辉、魏静娜、赵琳琳、张强、赵云平、薛天凯、徐石勇、郑贵忠。

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DB12/T884—2019

百合鳞茎中多糖的含量测定紫外/可见分光光度法

1范围

本标准规定了紫外/可见分光光度法测定百合鳞茎中多糖含量的原理、试剂材料、仪器设备、分析步骤、分析结果表述和精密度。

本标准适用于百合鳞茎干品及鲜品中多糖含量的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3原理

百合样品经水回流提取后得到的水提液，加乙醇沉淀得百合多糖，百合多糖加水溶解后，用蒽酮硫酸法在585nm波长处测定吸光度，用葡萄糖做标准品，外标法定量。

4试剂和材料

4.1试剂

4.1.1乙醇(C?H?OH)。

4.1.2蒽酮(C?H??O)。

4.1.3浓硫酸(H?SO?):浓度95%～98%(g/g)。

4.1.4水(H?O):GB/T6682规定的一级水。注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯

4.2试剂配制

蒽酮硫酸溶液(0.2%):称取蒽酮0.20g,加100mL浓硫酸溶解，摇匀，即得。现用现配。

4.3标准品

葡萄糖标准品(C?H??O):纯度≥98%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

4.4标准溶液配制

4.4.1葡萄糖标准储备液(1mg/mL):取干燥至恒重的葡萄糖对照品50mg,精密称定，用水溶解并定容至50mL,摇匀，即得，4℃以下保存。

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4.4.2葡萄糖标准系列工作溶液：精密量取葡萄糖标准储备液1mL、2mL、3mL、4mL、5mL,分别置50mL容量瓶中，用水定容，摇匀，得浓度为20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL的标准系列工作溶液。

5仪器和设备

5.1粉碎机。

5.2天平：感量0.001g和0.0001g。

5.3圆底烧瓶：250mL。

5.4水浴锅。

5.5具塞塑料离心管：聚丙烯，10mL。

5.6容量瓶：10mL、50mL。

5.7具塞比色管或刻度试管：10mL。

5.8紫外/可见分光光度计：配有1cm的玻璃或石英比色杯。

5.9涡旋混合仪。

5.10离心机：转速≥6000r/min。

5.11试验筛：40目。

6分析步骤

6.1样品制备

6.1.1干品

采样量要求大于500g,经粉碎机充分粉碎均匀，过40目筛，均分成两份，分别装入洁净容器内作为试样，密封并标明标记，于0～4℃下冷藏保存。

6.1.2鲜品

采样量要求大于500g,于真空干燥箱中50℃烘干后，按照干品处理方法6.1.1处理。

6.2样品提取

取样品粉末约1g,精密称定，置250mL圆底烧瓶中，精密加入100mL水，称定重量，水浴加热回

流2h,放冷，再称定重量，加水补足减失的重量，离心(6000r/min,10min),精密吸取上清液1.5

mL,加入乙醇7.5mL,摇匀，置4℃冰箱中放置3h,离心(6000r/min,10min),倾去上清液，沉

淀加热水溶解，并转移至50mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

6.3测定

准确吸取样品提取液及标准系列工作溶液各1mL,置10mL具塞试管中，分别准确加入0.2%蒽酮硫酸溶液(4.2)4mL,于涡旋仪上混匀，置沸水浴中加热10min,取出，冰浴中冷却5min,取