DB12T 883-2019 食用菌中甲醛的测定 高效液相色谱法.docxVIP

ICS65.020.20B04

DB12

天津市地方标准

DB12/T883—2019

食用菌中甲醛的测定高效液相色谱法

Determinationofformaldehydeinmushroom-Highperformanceliquidchromatography

2019-03-25发布2019-05-01实施

天津市市场监督管理委员会发布

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DB12/T883—2019

前言

本标准依据GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由天津市农业科学院提出并归口。

本标准起草单位：天津市农业质量标准与检测技术研究所。

本标准主要起草人：刘征辉、魏静娜、赵琳琳、张强、薛天凯、赵云平、徐石勇、郑贵忠。

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DB12/T883—2019

食用菌中甲醛的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了采用高效液相色谱法测定食用菌中甲醛的原理、试剂和材料、仪器和设备、操作步骤及结果表示。

本标准适用于食用菌中甲醛的含量测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3原理

用衍生液提取样品中的甲醛，反应生成甲醛衍生物。液液萃取净化后，在365nm波长处，液相色谱法测定，外标法定量。

4试剂和材料

4.1试剂

4.1.1乙腈(C?H?N)。

4.1.2硫酸铵((NH?)2SO?)。

4.1.3冰乙酸(C?H?O?)。

4.1.4乙酸钠(C?H?NaO?)。

4.1.52,4-二硝基苯肼：纯度≥99%(C?H?N?0?)

4.1.6水(H?O):GB/T6682规定的一级水。注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯。

4.2试剂配制

4.2.1缓冲溶液(pH5):称取2.64g乙酸钠，以适量水溶解，加入1.0mL冰乙酸，用水定容至500

mL。

4.2.22,4-二硝基苯肼溶液(0.6g/L):称取2,4-二硝基苯肼300mg,用乙腈溶解定容至500mL。

4.2.3衍生液：量取100mL缓冲溶液和100mL2,4-二硝基苯肼溶液，混匀。

4.3标准溶液

甲醛标准溶液：100μg/mL。安培瓶封装，置于10℃以上保存，使用前于室温下平衡，摇匀，推荐打开后一次性使用，或者将标准溶液转移至棕色瓶密封。

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5仪器和设备

5.1高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器或紫外检测器。

5.2天平：感量0.001g。

5.3粉碎机。

5.4涡旋混合仪。

5.5离心机：转速≥4000r/min。

5.6恒温振荡器。

5.7具塞塑料离心管：聚丙烯，50mL。

5.8具塞比色管或刻度试管：20mL。

6试样制备与保存

从所取全部样品中取出样品约500g,取可食部分经粉碎机充分粉碎均匀，均分成两份，分别装入洁净容器内作为试样，密封并注明标记。鲜样于-18℃下冷冻保存；干样于0～4℃下冷藏保存。

7分析步骤

7.1提取

称取已混匀的鲜样5.0g(干品1.0g),精确至0.001g,置于50mL塑料离心管中，准确加入10.0mL衍生液。旋紧塞子，涡旋混匀后置于60℃恒温振荡器中，150r/min振摇，间隔20min取出混匀一次，振摇1h后取出冷却至室温。

7.2净化

将样品提取液，以不低于4000r/min离心5min。如离心后溶液澄清，过0.22μm微孔滤膜后，滤液直接供HPLC测定。如离心后溶液浑浊或分层，在提取液中加入8g硫酸铵，混匀，以不低于4000r/min离心5min。移取上清液于20mL具塞比色管或刻度试管中，下层溶液用5mL乙腈重复萃取一次，合并上清液，用乙腈定容至10.0mL,混匀后，过0.22μm微孔滤膜，滤液供HPLC测定。

7.3甲醛衍生物标准溶液的制备

移取0μL、20μL、50μL、100μL、200μL、500μL甲醇标准溶液(4.3),置于10mL具塞比色管中，补加缓冲溶液(4.2.1)至5.0mL,再用2,4-二硝基苯肼溶液(4.2.2)定容至10.0mL,盖上塞后混匀，60℃水浴加热1h,取出冷却至室温。过0