免疫缺陷及免疫应用.pptVIP

沉淀反应（precipitation）可溶性抗原（血清蛋白质、细胞裂解液或组织浸液等）与相应抗体结合后，在一定条件下，出现肉眼可见的沉淀。补体参与的反应补体结合试验是一种有补体参与，并以绵羊红细胞和溶血素（红细胞的特异抗体）是否发生溶血反应作指示的一种高灵敏度的抗原与抗体结合反应。免疫标记技术用荧光素、酶或放射性核素等标记抗体或抗原，进行抗原抗体反应，具有高灵敏性、快速、定性、定量等优点。01免疫荧光法：常用FITC、PE等02酶免疫测定：常用HRP、AP等03放射免疫测定：常用125I和131I04化学发光免疫分析05免疫印迹(WesternBlot)免疫细胞的检测检测各群体淋巴细胞的数量与功能是观察机体免疫状态的重要手段。外周血是病人主要的检测标本，但仅代表再循环的淋巴细胞。实验动物还可取胸腺、脾、淋巴结等作为标本进行检查。PBMC多形核白细胞红细胞血浆分离液玻璃平皿单核细胞吸附,未吸附的为淋巴细胞.根据比重的不同将血液离心分层取PBMC一免疫细胞的分离1.外周血单个核细胞的分离常用密度梯度离心法2.亚群的分离尼龙棉柱分离----B细胞E花环分离---------T细胞流式细胞术免疫磁珠TE花环流式细胞仪工作原理添加标题添加标题添加标题添加标题添加标题流式细胞术酶免疫组化免疫荧光根据表面标志不同，分类计数淋巴细胞亚群的计数免疫细胞功能测定#2022淋巴细胞转化试验（形态学示意图）原理：人T细胞表面有PHA或ConA受体，T细胞在体外受PHA或ConA的刺激后能转化为体积较大、代谢旺盛、且能进行分裂的淋巴细胞，以此测定T细胞的功能。PHA刺激48~72小时③联合性免疫缺陷病X性连锁隐性遗传添加标题伴酶缺失的免疫缺陷病添加标题伴其他严重缺陷的免疫缺陷病添加标题④吞噬细胞功能缺陷特征：吞噬细胞数量减少和功能缺陷临床：慢性肉芽肿机制：中性粒细胞缺乏NADH/NADPH氧化酶，氧依赖杀菌能力减弱⑤补体系统缺陷机制：补体成分、调控蛋白遗传性缺陷临床：遗传性血管神经性水肿--C1INH缺乏，血管扩张，毛细血管通透性增高，皮肤、粘膜水肿获得性免疫缺陷综合征（AIDS）机体感染HIV所致的一组临床综合征，可出现细胞免疫严重缺陷，机会感染、恶性肿瘤和神经系统病变等。特征：以CD4+T细胞减少为主要特征病人多死于肿瘤或感染AIDS的传染源：1.无症状携带者AIDS患者AIDS传播方式:1.性接触感染血液感染垂直传播病原学：RNA逆转录病毒HIV分：HIV-1和HIV-2两型主要流行HIV-1发病机制及免疫学异常感染宿主细胞导致病毒大量复制，细胞死亡细胞间融合（多核巨细胞，细胞死亡）CD4/CD8比例下降、倒置Th数量下降，功能缺陷B细胞多克隆激活Mφ，IL-1，TNF-a升高NK下降，恶性肿瘤、病毒性感染发生率升高免疫缺陷病的治疗原则控制感染免疫重建基因治疗免疫制剂二、自身免疫性疾病概念和基本特征自身免疫性疾病（autoimmunedisease,AID）是指由于过度而持久的自身免疫应答，导致自身组织损伤和（或）功能障碍而引起的一类疾病。基本特征：1.?患者血液中可测到高效价自身抗体和/或自身应答性T淋巴细胞2.自身抗体和/或自身应答性T淋巴细胞作用于表达相应抗原的组织细胞，造成结构损伤或功能障碍3.动物实验可复制出与自身免疫病相似的动物模型，用患者血清或致敏淋巴细胞可使疾病转移，某些自身抗体可通过胎盘引起新生儿自身免疫病4.病情转归与自身免疫反应的强度密切相关5.?反复发作、慢性迁延6.?有遗传倾向，易发生于女性（二）、自身免疫病的分类器官特异性自身免疫病（organspecificautoimmunedisease）：病变常局限于某一特定的器官，由对器官特异性抗原的免疫应答引起；器官非特异性自身免疫病（non-organspecificautoimmunedisease）：又称全身性/系统性自身免疫病/结缔组织病/胶原病，病变可见于多种器官和结缔组织；（三）、损伤机制及典型疾病机制：自身抗体和（或）自身反应性T淋巴细胞介导的自身细胞或自身成分发生的免疫应答与某些超敏反应发病机制相同典型疾病：自身免疫性溶血性贫血自身免疫性血小板减少性紫癜自身免疫性中性粒细胞减少症毒性弥漫性