高三一轮复习：基因工程正式ppt课件.pptxVIP

选修3现代生物科技专题专题1基因工程

基础梳理

DNA重组技术的基本工具1.基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过__________和__________，赋予生物以__________的遗传特性，创造出符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在__________上进行设计和施工的，又叫做__________。DNA重组技术体外DNA重组转基因技术新DNA分子水平

归纳整合一、基因工程的概念基因工程的别名基因拼接技术或DNA重组技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA分子水平基本过程剪切→拼接→导入→表达结果人类需要的基因产物

2.基因工程的基本工具(1)“分子手术刀”——__________①来源：主要是从__________中分离纯化出来的。②功能：能够识别双链DNA分子的某种__________的核苷酸序列，并且使每一条链中__________部位的两个核苷酸之间的__________断开，因此具有__________性。③结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：__________和__________。专一限制性核酸内切酶（限制酶）原核生物特定特定磷酸二酯键黏性末端平末端

(2)“分子缝合针”——__________①两种DNA连接酶（大肠杆菌DNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：a.相同点：都缝合__________键。b.区别：大肠杆菌DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的__________之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合_____________。②与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将__________加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接__________的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶磷酸二酯黏性末端两种末端单个核苷酸两个DNA片段

考点一基因工程的基本工具一、与DNA分子相关的酶种类项目限制酶DNA连接酶DNA聚合酶解旋酶作用底物DNA分子DNA分子片段脱氧核苷酸DNA分子作用部位磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键碱基对间的氢键作用结果形成黏性末端或平末端形成重组DNA分子形成新的DNA分子形成单链DNA分子

①解旋酶：该酶能在DNA复制或转录时破坏DNA碱基对间的氢键，从而将双螺旋打开。②DNA水解酶：该酶能催化DNA水解。③RNA聚合酶：该酶能在转录时将单个的核糖核苷酸连接成RNA单链。④限制酶：该酶的作用是识别特定的核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA分子。区分以下几种酶

注：①用限制酶切割DNA分子时，被破坏的是DNA链中的磷酸二酯键（即连接相邻两个脱氧核苷酸的键）。②黏性末端是指双链DNA分子被限制酶切开后，切口处的两个末端伸出的由若干特定核苷酸组成的单链。

DNA连接酶

跟踪训练（2008年全国卷Ⅰ）已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如下图中箭头所指。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是（）A.3B.4C.9D.12C

解析：从这三个切点进行酶切，可得到片段种类有四种（即a、b、c、d四种）；从其中二个切点进行酶切，可得到不同于前面的片段种类有三种（即a+b、b+c、c+d三种）；只有一个切点时，得到不同于前面的片段种类有二种（即a+b+c、b+c+d二种）。故最多能产生片段种类数为4+3+2=9种。

考点二基因工程基本操作程序分析一、目的基因的获取途径1．从基因组文库中获取。2．人工合成目的基因常用的方法有：(1)已知核苷酸序列的较小基因，直接利用DNA合成仪用化学方法合成，不需要模板。(2)以RNA为模板，在逆转录酶作用下人工合成。3．PCR技术扩增目的基因

(3)PCR技术扩增目的基因①原理：__________。②过程第一步：变性：__________；第二步：复性：引物结合到互补DNA链；第三步：延伸：在热稳定DNA聚合酶作用下，从引物起始合成互补链。2.基因表达运载体的构建(1)目的：使目的基因在受体细胞中__________，并且可以__________，使目的基因能够__________。(2)组成：__________＋__________＋__________＋__________DNA解链DNA复制标记基因稳定存在遗传至下一代表达和发挥作用目的基因启动子终止子

PCR