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6.生物技术与工程(分值:69分)
1.(2024·内蒙古包头三模)(13分)海洋石油污染正引起广泛关注,利用基因工程菌进行生物降解具有巨大的应用潜力。P450是石油降解的关键酶,科研人员将获得的P450基因与质粒重组,构建基因表达载体,导入土著菌种Y9,获得了基因工程菌P450/Y9。回答下列问题。
(1)实验室培养微生物离不开培养基,而培养基中主要的四大类营养物质是,常用的接种方法有(答出两种即可)。?
(2)微生物培养最基本的要求是无菌操作,下列对培养基、接种环、双手、牛奶所采用的灭菌消毒方法的正确顺序依次是(填序号:①化学消毒、②高压蒸汽灭菌、③灼烧灭菌、④巴氏消毒法)。?
(3)为进一步探究并比较P450/Y9和Y9两个菌株在不同条件下降解石油的能力,研究人员选用两种培养基(成分如下表)进行了如下实验:
培养基类型
成分
培养基Ⅰ
K2HPO4、MgSO4、NH4NO3、石油
培养基Ⅱ
K2HPO4、MgSO4、石油
步骤一,将P450/Y9、Y9两个菌株分别接种在两液体培养基Ⅰ中,得到P450/Y9、Y9菌液。
步骤二,另取培养基Ⅰ、Ⅱ,添加琼脂分别制成平板Ⅰ、Ⅱ。在平板Ⅰ上制作两个直径相等的孔,标号ⅠA、ⅠB,平板Ⅱ也进行同样的操作,两个孔分别标号ⅡA、ⅡB。
步骤三,将等量等浓度的P450/Y9菌液、Y9菌液分别接种到平板Ⅰ的ⅠA、ⅠB,平板Ⅱ也进行同样的操作。
步骤四,相同且适宜条件下培养一段时间,记录平板Ⅰ、Ⅱ的透明圈大小如下表:
平板
平板Ⅰ
平板Ⅱ
菌株
ⅠA
ⅠB
ⅡA
ⅡB
透明圈大小
+++
++
++
-
注:“+”表示有透明圈,“+”越多表示透明圈越大,“-”表示无透明圈。
①培养基Ⅰ和培养基Ⅱ中提供碳源的都是。?
②本实验的自变量是,平板上出现透明圈的原因是。?
③本实验可以得出的结论是??。?
答案(1)碳源、氮源、无机盐和水平板划线法和稀释涂布平板法
(2)②③①④
(3)①石油②培养基的成分和菌株的类型细菌将平板中的石油分解③在有氮源的培养基上,P450/Y9菌株降解石油的能力高于Y9菌株;在无氮源的培养基上,Y9菌株无降解石油的能力,P450/Y9菌株降解石油的能力减弱
解析(1)培养基中主要的四大类营养物质是碳源、氮源、无机盐和水,常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(2)培养基要进行②高压蒸汽灭菌;接种环进行③灼烧灭菌;双手进行①化学消毒;牛奶采用④巴氏消毒法进行消毒。(3)实验目的为探究并比较P450/Y9和Y9两个菌株在不同条件下降解石油的能力。①培养基Ⅰ和培养基Ⅱ中提供碳源的都是石油。②本实验中人为改变的变量是培养基的成分和菌株的类型,所以培养基的成分和菌株的类型是本实验的自变量。由于细菌将平板中的石油分解,则在平板上出现透明圈。③培养基Ⅰ和培养基Ⅱ的区别就是培养基Ⅰ有氮源,培养基Ⅱ没有氮源,所以根据本实验中透明圈的大小可以判断在有氮源的培养基上,P450/Y9菌株降解石油的能力高于Y9菌株;在无氮源的培养基上,Y9菌株无降解石油的能力,但P450/Y9菌株降解石油的能力减弱。
2.(2024·广东广州二模)(10分)癌症的免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞,克服肿瘤的免疫逃逸,科研人员在不断研究中发现多种免疫治疗方法的结合是提高治疗效果的途径之一。请回答下列问题。
图1
图2
(1)免疫系统能够识别和清除突变的细胞,这体现了免疫系统的功能。?
(2)由于基因突变,癌细胞表面物质发生改变,如某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1。图1中PD-L1能抑制T细胞的活化,使癌细胞发生免疫逃逸。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗,据图1推测,其原因是?。?
(3)CD28是T细胞表面受体,T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。因此,科研人员尝试构建既能结合PSMA又能结合CD28的双特异性抗体PSMA×CD28,诱导T细胞定向杀伤癌细胞,如图2所示。
制备过程:先将分别注射到小鼠体内,分离出B淋巴细胞,诱导其与小鼠的骨髓瘤细胞融合,筛选得到,再诱导两种细胞融合。成功融合的细胞会表达两种L链和两种H链,由于会产生多种抗体,因此还需进行筛选,才能获得所需的双特异性抗体PSMA×
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