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以铜为镜，可以正衣冠；以古为镜，可以知兴替；以人为镜，可以明得失。——《旧唐书·魏征列传》

电镜练习题及参考答案

一、电镜练习题及答案

一、透射电镜标本取材的基本要求并简要说明。

答：取材的基本要求如下：

组织从生物活体取下以后，如果不立即进行及时固定处理，就有

可能出现缺血缺氧后的细胞超微结构的改变，如细胞出现细胞器变性

或溶解等现象，这些都可造成电镜观察中的人为假象，直接影响观察

结果分析，甚至导致实验失败。此外，由于处理不当造成组织微生物

污染，导致细胞的超微结构结构遭受破坏。

因此，为了使细胞结构尽可能保持生前状态，取材成败是关键，

取材成功的关键在于操作者必须要注意把握“快、小、冷、准”四个

取材要点。(1)．快：就是指取材动作要迅速，组织从活体取下后应在

最短时间(争取在1～2分钟之内)投入前固定液。对于实验动物，最好

在断血流、断气之前就进行取材，以免缺血缺氧后使细胞代谢发生改

变而破坏细胞的超微结构。当然，最好是采用灌注固定法。为了使前

固定的效果更佳，组织块要充分和固定液混合，应采用振荡固定10分

钟以上，有条件的可采用微波固定法固定。

(2)．小：由于常用的固定剂渗透能力较弱，组织块如果太大，块

的内部将不能得到良好的固定。因此所取组织的体积要小，一般不超

过1mm3。为便于定向包埋，可将组织修成大小约

1mm×1mm×2mm长条形。

(3)．冷：为了防止酶对自身细胞的酶解作用，取材操作最好在低

温(5℃～15℃)环境下进行，这样可以降低酶的活性，防止细胞自溶。

所采用的固定剂以及取材器械要预先在冰箱(5℃）中存放一段时间。

(4)．准：就是取材部位要准确，这就要求取材者对所取的组织解

剖部位要熟悉，必须取到与实验要求相关的部位，不同实验组别间要

取相同部位，如需要定向包埋的标本，则要作好定向取材工作。

此外，还要求操作动作轻柔，熟练，尽量避免牵拉、挫伤与挤压

对组织造成的人为损伤。

以铜为镜，可以正衣冠；以古为镜，可以知兴替；以人为镜，可以明得失。——《旧唐书·魏征列传》

二、什么是瑞利准则？电镜与光镜在原理上有何相似和不同之

处？

答：1、光线通过二个比较靠近的小孔时，这二个小孔的衍射图会

重叠在一起。

当一个衍射图的中央亮斑正好落在另一个衍射图的第一暗环中心

时，这二个点刚可以分辩。这就是显微镜分辩本领的瑞利准则。

2、相似点：光学显微镜是利用玻璃制作的透镜对光进行折射，将

一物点发

出不同角度的光线最终会聚成一个像点。电子显微镜是以电子束

作为光源，利用电磁透镜产生的电场或磁场折射电子束，并通过电子

束轰击荧光屏激发荧光而达到成像目的。

不同点：光镜的照明源是可见光，而电镜是用电子束照明。光镜

的透镜用玻璃制成，而电镜的透镜是轴对称的电场或磁场。

三、简述透射电镜及扫描电镜样品制作流程

答：1、透射电镜样品制作流程为取材——漂洗（生理盐水）—

—前固定（2.5%戊二醛，4oC冰箱2小时以上）——漂洗（0.1M磷

酸缓冲液，3次，45分

钟）——后固定(1%锇酸1小时左右)——漂洗（0.1M磷酸缓冲

液，3次，45分钟）——块染（1%