生物制品学复习资料.docVIP

生物制品学：指研究各类生物制品的来源，构造功能特点，应用，生产工艺，原理，存在问题，与发展前景等诸多方面知识的一门学科。

生物制品：以微生物，细胞，动物，或人源组织和体液等为原料，应用老式技术或现代生物技术制成，用于人类疾病的防止，治疗和诊断的药物。

人用生物制品包括：细菌类疫苗，病毒类疫苗，抗毒素以及抗血清，血液制品，细胞因子，生长因子，酶，体内及体外诊断制品以及其他生物活性制剂，如毒素，抗原，变态反应原，单克隆抗体，抗原抗体复合物，免疫调整剂及微生物态制剂。

根据构成及用途可分为：防止制品，治疗制品和诊断制品。

诊断制品可分为：（1）临床化学试剂（2）免疫学化学试剂（3）细菌学诊断试剂（4）病毒学诊断试剂（5）肿瘤诊断试剂（6）其他常用诊断试剂

体细胞治疗：应用人的自体，同种异体或异种的体细胞，经体外操作后回输人体的治疗措施。

基因治疗：以变化细胞遗传物质为基础的医疗基础。

一般生物制品的制备措施：原料的选择，预处理和保留措施。

原料选择：生物原料可来源于人体，动物，植物，微生物及海洋生物的生物组织或分泌物，也可来源于人工构建的工程细菌，工程细胞，及人工免疫的动植物。

注意事项：生长期对生理活性物质的含量影响很大（1）注意她生长的季节性（2）微生物原料最佳选用对数生长期（3）动物原料要选用合适的年龄和性别

原则：(1)原料来源丰富，产地靠近，成本低（2）原料新鲜，有效成分含量高易于获得（3）杂质含量尽量少（4）起始原料质量稳定，可控。

原料预处理：动物—立即处理，清除结缔组织，脂肪组织等，并迅速冷冻。植物—择时采集，清除不用部分，保鲜处理。微生物—将菌体与培养液分开，保鲜处理

目的产物的提取

提取：是分离纯化物质的第一步，其目的和作用是除去与目的物性质差异大的杂质，为背面的精致工序发明有利条件。

细胞破碎：是为了破坏细胞壁，使细胞内容物有效地释放出来，获得有效地提取。（1）高速匀浆法（高速匀浆器）（2）高速搅拌球磨破碎（3）超声波振荡法（破碎细胞的效率与声频，声能，处理时间，细胞浓度，PH，离子强度，细胞悬液的温度及细菌种类等原因有关）

=4\*GB3④压力法：渗透压，交压和减压3种。

=5\*GB3⑤反复冻融法；疏水键形成冰晶粒

=6\*GB3⑥化学渗透法；变化细胞通透性

=7\*GB3⑦酶溶解破碎法；

2，固液分离：可采用离心，膜过滤或双水相分派等措施。

双水相分派法：向水相中加入溶于水的某种高分子化合物，行成浓度不一样的两相，溶质在两相中的溶解度不一样，从而分离。

3．目的产物的分离纯化：一般程序为一首相根据产品分子构造和理化性质制定出可行措施二破碎细胞提取混合物三先粗提在深入分离纯化四分析鉴定制成制剂

生物制品的分离纯化措施

蛋白质类

A1根据分子大小过滤直径不小于10um;微过滤（孔径0.2um可截留细菌0.1um可截留支原体）；超滤（直接分离病毒、核酸、多糖）

2根据密度可分为：离心和超速离心

3根据大小分为凝胶过滤层析技术（脱盐分级分离）

4透析运用半透膜

B运用电性进行分析纯化

1等电点沉淀：当蛋白质溶液PH=PI时，蛋白质净电荷为0，因而失去了水化膜和分子间互相作用，疏水性氨基酸残基暴露，蛋白质分子互相靠拢汇集最终形成沉淀析出

2离子互换层析技术根据流动相中的组分离子与互换剂平衡离子进行可逆互换的结合力大小进行分离

3电泳和等电聚焦电泳

C1盐析技术：相稳定的蛋白质溶液中加入易容的盐，能与蛋白质竞争分子的水合作用，破坏蛋白质的水化层，调PH至等电点，层析出

2乙醇和聚乙二醇（PEG）:很强的亲水性溶于水中不发热升温，不会引起蛋白质变性

3疏水层析法根据不一样生物大分子疏水性强弱性不一样进行

D运用蛋白质的化学性质

1辛酸沉淀：从血清和腹水中纯化IgG

2利凡诺沉淀吖啶染料与蛋白质形成可逆的结合沉淀

3固相化染料柱层析

4螯合柱层析

E运用生物学活性分离

E-S或克制剂抗原-抗体激素细胞因子-受体

F羟基磷灰石层析

二核酸类

注意1温和条件2低温条件下进行3防止核酸酶作用环节1破碎细胞，提取蛋白质（SDS苯酚）2用乙醇沉淀的核酸溶液，RNA酶3纯化过程电泳梯度离心

三糖类单糖易溶于水合温乙醇

四氨基酸类

1天然蛋白质水解法a酸水解H2SO4HCL长处水解迅速，产生为L型氨基酸，无消旋作用缺陷:丝氨酸所有破坏产生费酸b碱水解：NaOHBa(OH)2100摄氏度6小时

长处：水解彻底，Ser不被破坏。缺陷：含羟基或巯基的aa所有破坏，且产生消旋作用。

（3）酶解法长处：反应条件温和，无需特殊设备，不破坏aa，无消旋。缺陷：水解不彻底