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板块六生物技术与工程
专题十三发酵工程
答案:①醋酸菌②碳源③尿素④稀释涂布平板法
考点1微生物的培养、分离与计数
1.无菌技术常用方法
2.微生物的纯化技术
(1)制备马铃薯琼脂培养基
(2)两种纯化微生物方法的比较
3.微生物分离与计数的两个实例
(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
(2)纤维素分解菌的分离
答案:eq\o(□,\s\up1(1))紫外线eq\o(□,\s\up1(2))接种环eq\o(□,\s\up1(3))涂布器eq\o(□,\s\up1(4))选择
eq\o(□,\s\up1(5))纤维素eq\o(□,\s\up1(6))红色复合物eq\o(□,\s\up1(7))透明圈
【真题研读】
(2023·广东选择考)研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线(如图)和选择培养基筛选原理来判断,下列最可能筛选到目标菌的条件组合是(D)
A.a点时取样、尿素氮源培养基
B.b点时取样、角蛋白氮源培养基
C.b点时取样、蛋白胨氮源培养基
D.c点时取样、角蛋白氮源培养基
解析:由图可知,随着堆肥时间的延长,堆肥温度先升高后保持稳定,a点时堆肥温度最低,c点时堆肥温度最高。该实验的目的是筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌,应该用以角蛋白为唯一氮源的培养基进行筛选培养,且应该在高温条件下取样,即c点时取样,D符合题意。
[命题延伸]——判断与填空
(1)某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病,其筛选流程及抗性检测如图。
判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小。()
(2)不含氮源的平板不能用于微生物培养。()
(3)将培养基分装于培养皿中后灭菌,可降低培养基污染的概率。()
(4)为提高一株石油降解菌的净化能力,将菌涂布于以石油为唯一碳源的固体培养基上,以致死率为90%的辐照剂量诱变处理。涂布用的菌浓度应控制在30~300个/mL。()
(5)稀释涂布平板法和平板划线法均能得到单菌落,都可用于细胞计数。()
(6)采用液体培养基培养酵母菌,可以用淋洗液为原料制备培养基,培养基中还需要加入氮源等营养成分,氮源的主要作用是__________________________________(答出1点即可)。
(7)为快速分离产淀粉酶的枯草芽孢杆菌,可将土样用________制成悬液,再将含有悬液的三角瓶置于80℃的________中保温一段时间,其目的是________________。
(8)枯草芽孢杆菌为好氧微生物,液体培养时应采用________(填“静置”或“摇床振荡”)培养。培养过程中抽样检测活菌数量时,应采用________________(填“稀释涂布平板法”或“显微镜直接计数法”),其原因是_________________________________。
提示:(1)√(2)×(3)×(4)×(5)×(6)用于合成微生物细胞中的含氮化合物,如核酸、蛋白质等(7)无菌水水浴杀死不耐热微生物(8)摇床振荡稀释涂布平板法用稀释涂布平板法在培养基上看到的每一个菌落一般都来自一个活细胞,而显微镜直接计数法会将死亡的枯草芽孢杆菌也计算在内
【对点突破】
题点1培养基的制备与无菌操作
1.(2024·惠州高三一模)微生物的纯培养既需要适宜的培养基,又要防止杂菌污染。下列相关叙述正确的是(A)
A.消毒和灭菌的杀菌程度存在差异
B.培养基中的营养物质浓度越高,对微生物的生长越有利
C.微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物
D.操作者要对操作的空间、自己的衣着和手进行清洁和灭菌
解析:由消毒和灭菌的概念可知,二者的杀菌程度存在差异,A正确;培养基中的营养物质浓度过高,微生物会通过渗透作用失水,对微生物的生长不利,B错误;在微生物培养过程中,由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物,C错误;操作者对操作的空间、自己的衣着和手进行的是清洁和消毒处理,D错误。
2.进行土壤中尿素分解菌的选择培养时,利用的培养基组分及含量如下表所示。下列分析错误的是(D)
组分
含量
KH2PO4
1.4g
Na2HPO4
2.1g
MgSO4·7H2O
0.2g
葡萄糖
10.0g
尿素
1.0g
琼脂
15.0g
H2O
定容至1000mL
A.KH2PO4和Na2HPO4既可为菌体提供无机盐,又可调节培养基的pH
B.尿素既可为尿素分解菌提供氮源,又可对培养基中的微生物起选择作用
C.琼脂在实验过程中起凝固剂的作用
D.蒸馏水既可进行定容,又可对培养液进行稀释以便于计数
解析:KH2
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