DB33 3007-2015 食品安全地方标准 食品中4-己基间苯二酚残留量的测定　　.docxVIP

DB33

浙江省地方标准

DB33/3007—2015

食品安全地方标准

食品中4-己基间苯二酚残留量的测定

2015-09-10发布2015-12-10实施

浙江省卫生和计划生育委员会发布

DB33/3007—2015

I

前言

本标准为首次发布。

本标准的附录A为资料性附录。

DB33/3007—2015

1

食品安全地方标准

食品中4-己基间苯二酚残留量的测定

1范围

本标准规定了虾、蟹类水产品和果蔬中4-己基间苯二酚（4-HR）残留量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于虾、蟹类水产品和果蔬中4-己基间苯二酚的测定。

2原理

用乙腈-二氯甲烷溶液提取样品中4-己基间苯二酚，提取液经氨基固相萃取柱净化、浓缩，残渣用流动相溶解，液相色谱-荧光检测器检测，外标法定量。

3试剂和材料

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

3.1乙腈（CH3CN）：色谱纯。

3.2二氯甲烷（CH2Cl2）。

3.3甲醇（CH3OH）。

3.4丙酮（CH3COCH3）。

3.5正己烷（C6H14）。

3.6乙腈水溶液（6+4，V/V）：量取60mL乙腈（3.1）和40mL水，混匀后备用。

3.7甲醇-丙酮溶液（1+1，V/V）：量取50mL甲醇和50mL丙酮，混匀后备用。

3.8乙腈-二氯甲烷溶液（7+3，V/V）：量取70mL乙腈和30mL二氯甲烷，混匀后备用。

3.94-己基间苯二酚标准品：CAS136-77-6，纯度大于99.0%。

3.104-己基间苯二酚标准溶液：准确称取100mg（精确到0.1mg）的标准品于100mL容量瓶中，用乙腈水溶液（3.6）溶解并定容至刻度，配制成浓度为1mg/mL标准储备液，贮存于0℃~4℃冰箱中密封保存，溶液有效期1个月。临用前，取此储备液，用乙腈水溶液（3.6）稀释成所需浓度的标准工作

液。

3.11氨基固相萃取柱：500mg，3mL，或相当者。使用前用6mL甲醇丙酮溶液（3.7）和6mL正己烷活化。

3.12微孔滤膜：0.45μm，有机系。

3.13氮气：纯度大于等于99.9%。

4仪器

4.1高效液相色谱仪：配荧光检测器。

4.2天平：感量0.01g。

4.3分析天平：感量0.0001g。

4.4离心机：最大转速10000r/min。

DB33/3007—2015

2

4.5旋涡混合器。

4.6旋转蒸发仪。

4.7固相萃取装置。

4.8氮气吹干仪。

4.9高速组织捣碎机。

5操作方法

5.1样品处理

5.1.1试样制备和保存

从原始样品中取出代表性样品500g，虾去头、去壳、去附肢，取可食部分；蟹去壳、去鳃等取可食部分；果蔬去皮。用组织捣碎机捣碎混匀，均分成两份分别装入洁净容器中作为试样，密封并标识。将试样放入-18℃以下保存。

制样和试样保存过程中，应防止试样受到污染或发生残留物含量的变化。

5.1.2提取

称取5g（精确到0.01g）样品置于50mL离心管中，加入10mL乙腈二氯甲烷溶液（3.8），高速组织捣碎机匀浆2min，盖塞，旋涡混匀1min，超声提取10min，8500r/min离心5min，取上清液转入100mL旋转蒸发瓶中，重复上述操作一次。合并提取液于45℃旋发至近干，取7.5mL二氯甲烷分三次超声溶解，合并，待净化。

5.1.3净化

将5.1.2中的待净化液转移至固相萃取柱（3.11）中。用6mL正己烷淋洗，将固相萃取小柱抽至近干，用6mL甲醇丙酮溶液（3.7）洗脱，流速不超过1mL/min，收集洗脱液。洗脱液于50℃用氮气吹干，残留物用1.0mL流动相溶解，过微孔滤膜（3.12），供液相色谱测定。

5.2样品测定

5.2.1色谱条件

a)色谱柱：C18柱，150mm×4.6mm（内径），5μm。

b)流动相：乙腈+水（6+4，V/V）。

c)流速：1.0mL/min。

d)柱温：35℃。

e)激发波长：280nm。

f)发射波长：310nm。

g)进样量：10μL。

5.2.2标准工作曲线的绘制

用流动相将4-己基间苯二酚标准溶液（3.10）稀