第四节微生物培养法概论ppt课件.pptxVIP

微生物学;第四节微生物培养法概论;一个良好的微生物培养装置的基本条件是：按微生物的生长规律进行科学的设计，能在提供丰富而均匀营养物质的基础上，保证微生物获得适宜的温度和良好通气条件（只有少数厌氧菌例外），此外，还要为微生物提供一个适宜的物理化学条件和严防杂菌的污染等。;微生物的培养方法可分为八个大类;;一、实验室培养法

（一）固体培养法

1.好氧菌的固体培养;大多数微生物都是好氧菌，微生物一般只能利用溶于水中的氧，要保证在培养液中始终有较高的溶解氧浓度。;一般情况下（1大气压，20℃）下，氧在水中的溶解度仅为6.2ml／L（0.28mmol），这些氧只能保证氧化8.3mg（即0.046mmol）葡萄糖，仅相当培养基中常用葡萄糖浓度的1‰。氧的供应始终是好氧菌生长、繁殖中的限制因子。;一般可通过增加液体与氧的接触面积或提高氧分压来提高溶氧速率，具体措施有：

①浅层液体静止培养；

②将三角瓶内培养物利用往复式或旋转式摇床（shaker）作摇瓶培养（shake-flaskcultivation）；

③在深层液体培养器的底部通入加压空气，并用气体分布器使其产生均匀、密集的微小气泡；

④对培养液进行机械搅拌，并在培养器的壁上设置阻挡装置等。

;（4）台式发酵罐（benchtopfermentor）;2.厌氧菌的液体培养;厌氧罐或厌氧手套箱;二、生产实践中培养微生物的装置

（一）固体培养法

1.好氧菌的曲法培养;曲（qu或mouldybran）;根据制曲的容器形状和规模的大小分类;挂曲;一般是由一个面积在10m2左右的水泥曲槽组成，槽上有曲架和用适当材料编织成的筛板，其上可摊一层约30cm厚的曲料，曲架下部不断通低温、湿润的新鲜过滤空气，制备半无菌状态的固体曲。;转鼓式自动固体培养装置

这是以米为原料，米曲霉（Asperigillusoryzae）固体培养生产日本酒曲的转鼓装置示意图。清洗、蒸煮、接种、固体翻松、水的喷淋、冷却、空气循环、过滤和排气等所有操作都在该装置上完成。;2.厌氧菌的堆积培养法;（二）液体培养法

1.好氧菌的培养;生产实践上对厌氧菌进行大规模固体培养的例子还不多见。在白酒???产中，一向用大型深层地窖对固态发酵料进行堆积式固态发酵，这对酵母菌的酒精发酵和己酸菌的己酸发酵等都十分有利，可生产名优大曲酒（蒸馏白酒）。;（1）高层琼脂柱;（2）厌氧培养皿;Ⅱ利用特制皿底——有两个相互隔开的空间，其一放焦性没食子酸，另一则放NaOH溶液，待在皿盖平板上接入待培养的厌氧菌后，立即密闭之，经摇动，使两试剂接触而发生吸氧反应，从而造成无氧环境，;（3）亨盖特滚管技术（hungateroll-tubetechnique）;;（4）厌氧罐（anaerobicjar）;（5）厌氧手套箱（anaerobicglovebox）;（1）试管液体培养;（2）三角瓶浅层液体培养;;（3）摇瓶培养;（4）台式发酵罐（benchtopfermentor）;（1）浅盘培养（shallowpancultivation）;（2）深层液体通气培养;发酵罐（fermenter或fermentor）是一种最常规的生物反应器（bioreactor），一般是钢质圆筒形直立容器，其底和盖为扁球形的，高与直径之比一般为1∶2～2.5。容积可大可小，大型发酵罐的容积在50～500m3，最大的为英国用于甲醇蛋白生产的巨型发酵罐，其有效容积达1500m3。;发酵罐的主要作用是要为微生物提供丰富而均匀的养料，良好的通气和搅拌，适宜的温度和酸碱度，并能确保防止杂菌的污染。为此，除了罐体有合理的结构（图7-17）外，还要有一套必要的附属装置，例如培养基配制系统，蒸气灭菌系统，空气压缩和过滤系统，以及发酵产物的后处理系统[俗称“下游工程”（down-streamprocessing）]等。;