厌氧菌的培养方法.pptVIP

厌氧菌的培养方法祁红兵物理方法包括遮断空气法、煮沸法、真空法、空气置换法、气体喷射法或转管法等01化学方法包括焦性没食子酸法、铁丝绒法、保险粉法等02生物学方法包括与需氧菌共生好氧法、燕麦发芽法等03混合法包括厌氧罐（袋）法、厌氧手套箱法或厌氧室法、空气置换铁丝绒法、空气置换钯粒法等。041液体培养基的厌氧培养法培养基煮沸：驱气后置流水中急速冷却添加还原剂：03～0.05％L-盐酸半胱氨酸01～0.02％硫乙醇钠5～1％葡萄糖1％抗坏血酸其它还原剂添加琼脂厌氧罐法01简易厌氧罐和厌氧袋法02钢丝绒法03焦性没食子酸法04抽气换气厌氧培养法05生物好氧厌氧培养法06转管技术和气体喷射培养法07厌氧手套箱法（又称厌氧室法）082固体培养基的厌氧培养法2.1Gas-pak法原理气体发生袋：柠檬酸和碳酸氢钠＋H2OCO2硼氢化钠＋H2OH2触媒：钯粒H2O厌氧罐中的O2厌氧指示剂11111亚甲基兰指示剂卢卡斯固体厌氧指示剂布鲁氏指示剂厌氧指示剂6％葡萄糖水溶液21N氢氧化钠水溶液0.105％亚甲基兰水溶液0.2厌氧无色残存有氧气蓝色亚甲基兰指示剂2％硼砂溶液5毫升酚红溶液0.1～0.2毫升9％硫乙醇酸1毫升02％美兰溶液10毫升琼脂1％厌氧无色残存有氧气蓝色卢卡斯固体厌氧指示剂60％羟甲基氨基甲酯114％葡萄糖1202％美蓝1厌氧无色残存有氧气蓝色3布鲁氏指示剂平皿培养基装入平皿架中置厌氧罐内；打开内盖居中金属网袋，装入触媒钯粒；打开锡箔纸袋，取出厌氧指示剂片；剪开气体发生袋一角，注入10毫升水，迅速紧闭罐盖，置培养箱中培养。约经5～10分钟后，放入厌氧指示剂片。0304050102Gas-Pak罐的使用操作程序2.2.1简易厌氧罐干燥器容内径（厘米）容器1容器2容器3容积（毫升）硼氢钠氯化钴0.2克柠檬酸0.6克15cm（约2150毫升）或和0.6克钯粒1.5克碳酸氢钠0.7克18cm（约3500毫升）硼氢钠氯化钴0.33克柠檬酸1克或和1克钯粒2克碳酸氢钠1.15克5%55%30%10%聚碳酸酯（复合塑料膜）制厌氧袋厌氧指示剂产气袋触媒2.2.2厌氧袋法二亚硫酸钠（Na2S2O4）碳酸氢钠无水硫酸钠不用触媒2.2.3保险粉的厌氧罐培养法01酸性硫酸铜溶液02钢(铁)丝绒03铜和铁的络合物04O2厌氧指示剂2.3钢丝绒法02酸性硫酸铜溶液：将自来水1升加硫酸铜60g，吐温-8020ml，加热溶解后，又加入2N的硫酸90ml，最后加水至6升