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第二章细胸工程
第一节植物细胞工程
细胞工程:细胞工程是指应用细咆牛.物学、分了牛?物学和发育生物学等多学科的原理.和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性生物工程。
原理和方法:细胞生物学和分子生物学。
操作水平:细咆水平或细咆器水平。
目的:按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品°一、植物细胞工程的基本技术
细胞的全能性:细胞经一分裂_和_分化—后,仍然具有—产生完整生物体一或一分化成其他各种细胞—的一潜能,即细胞具有一全能性一。
细胞具有全能性的原因(物质基础)
生物体的细胞中都含有该物种的全套遗传物质,都有一发育成为完整个体所需的全部遗传信息
生物体生长发育过程中细胞不表现全能性的原因(不离体的细胞无法表现出全能性的原因)
在特定的时间时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性地表达
全能性大小比较
(1) 受精卵、体细胞、生殖细胞
受精卵生殖细胞〉体细胞
(2) 分化程度高的细胞、分化程度低的细胞
_分化程度低的细胞〉分化程度高的细胞
(3) 分裂能力强的细胞、分裂能力弱的细胞
_分裂能力强的细胞〉分裂能力弱的细胞
(4) 植物细胞、动物细胞
—植物细胞〉动物细胞
(5) 幼嫩的细胞、衰老的细胞
一幼嫩的细胞〉衰老的细胞一
(-)植物组织培养技术
概念:植物组织培养是指将警也的植物霆_、顼织_或_细胞—(称为—外植体_)等,培养在人工配制的一培养基上,给予一适宜的培养条件一,诱导其形成一完整植株—的技术。
原理:_植物细胞的全能性_
生殖方式:—无性生殖—
分裂方式:一有丝分裂一
5.过程:
5.过程:
脱分化:在一定的一激素_和_营养—等条件的—诱导_下,—己经分化—的细胞—失去其特有的结构和功能_,转变成一未分化的细胞的过程。
再分化:_愈伤组织—能重新—分化_成_芽、根等器官一的过程。
探究.实践:菊花的组织培养
(1)原理
植物细胞一般具有能性
在一定的激素和营养等条件的诱导下,己经分化的细胞可以经过」!蚣化.和[分化形成一胚状体―,长出—芽和根进而发育成_完整的植株一;
对供、受体的选择和处理
对供、受体进行的相同处理:_同期发情处理一
只对供体进行的操作:—超数排卵处理—
配种或人工授精:应选择一同种的优良公牛一
胚胎的收集、检查、培养或保存
胚胎收集的基础:哺乳动物早期胚胎形成后,在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系,而是处于游离状态:②该阶段检查的目的:一检查胚胎的质量—:③胚胎保存的方法:项96°C液氮中保存一
胚胎的移植:一般选择移植_桑共胚或囊胚阶段的胚胎一
移植后的检查:第二次检查的目的:_对受体进行妊娠检查(检查受体是否妊娠)一
(三)胚胎分割
1,概念:采用一机械方法一将一早期胚胎—切割成_2割份、4等份或8等份一等,经移植获得一同卵双胎或多畋的技术。
材料:应选择发育良好、形态止常的桑棋胚或囊胚。
实质:胚胎分割可增加动物后代的数量,其实质是动物的无性繁殖或克隆。
操作要求:对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将内细胞团均等分割。
胚胎干细胞:
来源:从昱地强或原始性腺中分离出来的一类细胞。
?形态:体积小、细胞核大、核仁明显
特点,功能:具有发育的全能性
、体外培养:可以只增殖而不发生分化
用于治疗人类的某些顽症
应用,培育人造组织器官
.研究体外细胞分化的理想材料
胚胎分割的优点:
可以促进优良动物品种的繁殖:
产生的遗传性状相同的后代是进行遗传学研究的宝贵材料:
在胚胎移植前,进行性别鉴定、遗传病筛查等,对于人工控制动物性别、动物繁育健康后代有重要意义。
胚胎移植的局限性
采用胚胎分割技术产生同卵多胎的可能性是有限的,分割次数越多,分割后胚胎成活的概率越小,日前仍然以二分胚胎的分割和移植效率最高。
③植物激素中一生长素—和一细胞分裂素—是启动—细胞分裂一、—脱分化—和—再分化_的关键激素,它们的遂也、_比例一等都会影响植物细胞的发育方向。
生长素用量与细胞分裂素用来的比值
结果
比值高
有利丁?根的分化,抑制芽的形成
比值低
有利于芽的分化,抑制根的形成
比值适中
促进愈伤组织的形成
(2) 材料用具
外植体:_幼嫩的菊花茎段_:经常选择根尖(分生区)、茎的韧皮部(形成层)等分裂能力强、分化程度低的区域作为材料,容易诱导形成愈伤组织。
体积分数为70%的酒精:对手、超净工作台、外植体进行消毒。
质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液:对外植体进行消毒。
无菌水:清洗外植体。
培养基:包括无机营养成分(水和无机盐)、有机营养成分(蔗糖、氮基酸、维生素等)、特定浓度和比例的激素(主要是生长素和细胞分裂素)。
(3) 方法步骤
①消毒一②外植体切段一③接种一④脱分化一⑤再分化一⑥移
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