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第二章细胞生物学研究方法
细胞生物学概念
细胞生物学(CellBiology):是探讨细胞
生命现象的发生规律及其本质的科学。
在不同水平上研究细胞结构、功能和行为的
科学。
重点
第一节细胞生物学基本研究方法
一、显微镜技术(重点)
二、细胞化学技术(放射自显影技术)
三、细胞的分离和分析技术(离心分离技术)
四、细胞培养技术(概念)
第一节细胞生物学基本研究方
法
一、显微镜技术
Ø光学显微镜技术
(Opticalmicroscopy)
Ø电子显微镜技术
(Electronmicroscopy)
一、显微镜技术
分辨率或分辨力:
在人的明视距离25cm处,能清楚的分辨
被检物体细微结构最小间隔的能力,用
R来表示。
R=0.61λ/nsinα
光线名称可见光紫外光0.1kv电子10kv电子束100kv电子
束束
波长nm390~76013~3900.1230.01220.00387
一、显微镜技术
分辨率(resolution,R)
Objectivelens2α
..
R=0.61λ/NAα
N.A.=nsinα
Condenser
lens
数值孔径(numericaperture)
光学显微镜技术(Opticalmicroscopy)
1、普通光学显微镜Lightmicroscope
光学显微镜技术(Opticalmicroscopy)
1、普通光学显微镜
原理:利用一组透镜将
标本连续放大。
最大分辨率:0.2um
光学显微镜技术(Opticalmicroscopy)
1、普通光学显微镜
目镜
反射棱镜
物镜
标本
聚光器
光源
光学显微镜技术(Opticalmicroscopy)
Lightmicrographs
光学显微镜技术(Opticalmicroscopy)
1、普通光学显微镜
AB
人口腔粘膜上皮细胞
光学显微镜技术(Opticalmicroscopy)
1、普通光学显微镜
标本制备:
甲醛、戊二醛、
乙醇
取
包埋切片
材固定
染色观察
直接涂片
(固定)
光学显微镜技术(Opticalmicroscopy)
2、荧光显微镜
(Fluorescencemicroscope)
原理:紫外线作为光源
主要用途:
细胞结构观察、细胞化学成分
研究、DNA&RNA含量变化
光学显微镜技术(Opticalmicroscopy)
荧光显微镜图片
荧光显微镜观察到的细胞图片照片
(微管呈绿色、微丝红色、核蓝色)
光学显微镜技术(Opticalmicroscopy)
3、相差显微镜
(Phasecontrastmicroscope)
原理利用光的衍射和干涉效应把透过细胞
不同区域的光波的光程差转变成振幅差,从
而主使要活用细途胞内部各结构之间呈现清晰可见的
活明细暗胞对结比构。观察、
细胞活动观察
光学显微镜技术(Opticalmicroscopy)
Phasecontrastmicrograph
光学显微镜技术(Opticalmicroscopy)
Phasecontrastmicrograph
光学显微镜技术(Opticalmicroscopy)
4、暗视野显微镜
(Darkfieldmicroscope)
原理特殊的聚光器,使得光线不能直
接进入物镜,被样品散射的光线确可以
进主要入用物途镜而被放大。因此,在黑暗的背
景观中察活可细以胞看外到形明亮清晰的图像。
光学显微镜技术(Opticalmicrosco
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