室内环境监测其他污染物的检测1菌落总数98课件讲解.pptx

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重点学习撞击法测菌落总数的检测，通过撞击法测菌落总数理解撞击式微生物采样器的采样原理，掌握室内空气中菌落总数的检测，学会撞击式空气微生物采样器、高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱的使用和操作。难点在于根据检测结果正确评价菌落总数对室内环境的影响。;任务概述

根据检测方法不同，空气中菌落总数的表示方法有两种：

一种是按暴露于空气一定时间的标准平板上产生的细菌菌落数来表示，采用自然沉降法，如使φ9cm的营养琼脂平板在采样点暴露5min，经37℃、48h培养后计数生长的细菌菌落数的采样测定方法；

另一种是按每立方米空气中的细菌菌落表示，采用撞击式空气微生物采样器采样，通过抽气动力作用，采集空气中的含有微生物的粒子，经37℃、48h培养后，计算出每立方米空气中的细菌菌落数。;项目四任务一：菌落总数的检测;（2）危害

室内空气微生物的分类：非致病性腐生微生物；来自人体的病原微生物；尘螨；真菌。其危害是：空气传播的病原微生物可引起肺炎、鼻炎、水痘、麻疹和流感、呼吸道、皮肤过敏等疾病；空气中传播的生物性物质会诱发变应性疾病如外源性变应性肺泡炎、变应性鼻炎和哮喘等；另外经常食用被致病微生物群污染的粮食、食品、饮料、水可引起消化道疾病；螨虫是强致敏原，可使人患过敏性鼻炎、过敏性湿疹及过敏性哮喘。;2、任务解析

（1）标准与规范

撞击法检测菌落总数，是依据GB/T15432方法检测室内空气中细菌总数，其限值为2500cfu/m3（依据仪器定）。该检测对象及评价现依据国家《室内空气质量标准》GB/T18883-2002执行。

（2）检测方法

撞击法检测菌落总数法;3、任务实施

撞击法检测菌落总数法

①原理

撞击法是采用撞击式空气微生物采样器采样，通过抽气动力作用，使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流，使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上，在37℃环境下、经48h培养后，计算出每立方米空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。;3、任务实施

(1)撞击法检测菌落总数法

②仪器

◆撞击式空气微生物采样器采样;

◆其他仪器与设备：高压灭菌箱、干热灭菌器、恒温培养箱、冰箱、平皿（直径5厘米）

◆制备培养基用的一般设备：量筒、三角烧瓶，pH计或精密pH试纸等。;3、任务实施

(1)撞击法检测菌落总数法

③试剂和材料

营养琼脂培养基

成分：蛋白质20g；牛肉浸膏3g；氯化钠5g；

琼脂15～20g；蒸馏水1000mL。

制法：将上述各成分混合，加热溶解，校正pH至7.4，

过滤分装，121℃，20min高压灭菌。

撞击法参照采样器使用说明制备营养琼脂平板;3、任务实施

(1)撞击法检测菌落总数法

④检测步骤

ⅰ选择有代表性的房间和位置设置采样点。

ⅱ将采样器消毒、按仪器使用说明进行采样。一般情况下采样量为30到150升，应根据仪器性能和室内空气微生物污染程度，酌情增加或减少空气采样量。

ⅲ样品采完后，将带菌营养琼脂平板置（36±1）℃恒温箱中，培养48h，计数菌落数。;3、任务实施

(1)撞击法检测菌落总数法

⑤结果计算

根据采样器的流量和采样时间，换算成每立方米空气中的菌落数，以cfu／m3报告结果。

采样空气中细菌总数计算：;3、任务实施

(1)撞击法检测菌落总数法

⑥成果记录;4、任务小结

（1）配制平皿实验台使用水平仪提前校正，保证加注培养基后平皿内琼脂厚度均匀，厚度不均匀将影响撞击和旋转。

（2）加注平皿培养基必须无菌操作，预防污染。

（3）采样器监测头消毒后，连续监测可不消毒，但更换新监测点时，必须消毒后方可继续工作。

（4）采样位置应避开空气流动大的地方，如敞开的门或窗附近，以防影响实际监测结果。

（5）为避免在一些监测环境下培养基表面干燥，影响微生物生长，每个平皿取样时间不可超过12分钟，可为10分钟。

（6）采样后注意无菌操作。;ThankYou!