第十三章基因的转录、转录后加工及逆转录ppt课件.pptxVIP

第十三章基因的转录、转录后加工及逆转录;◆转录(transcription)：

以DNA单链为模板，NTP为原料，在DNA依赖的RNA聚合酶催化下合成RNA链的过程。

◆转录的条件：

;◆转录、复制的异同点;◆几个基本概念;结构基因(structuregene)：

DNA分子中能转录出RNA的区段。;模板链：

反意义链（antisense，(-)链）

——以该链中的DNA碱基顺序指导RNA的合成即被转录的那条DNA链。

;第一节参与转录的酶

RNA聚合酶——依赖DNA的RNA聚合酶

（DNA-dependentRNApolymerase,DDRP）;一、原核生物RNA聚合酶;全

酶

核

心

酶

;二、真核生物RNA聚合酶（三种）;第二节?转录过程

(起始、延长、终止);DNA模板

启动子（promoter）

1、概念:

转录开始时能与RNA全酶结合的DNA顺序（双链）

2、原核生物启动子的特点:

(1)DNA序列在转录起始点的5’端区(上游区)

(2)-10bp处-TATAAT-(Pribnowbox)

(3)-35bp处-TTGACA-

;;σ因子

RNA聚合酶中识别及结合启动子的亚基，延长时脱落，不参与转录过程，是转录辅助因子。

σ因子识别位点：启动子-35区、-10区;原核生物有多种σ因子

一般情况下起作用的是---σ70

σ70有四个保守区域：

第2区域、第4区域和-35区和-10区结合

;结合过程：

闭和的启动子复合体

RNA聚合酶（全酶）中的σ因子在DNA双链

上迅速、随机滑动，寻找到启动子-35区，

形成疏松的复合物，DNA双链未解开。

开放的启动子复合体

RNA聚合酶（全酶）移向-10区和转录起始

点在-20区DNA双链解开12-17bp时的启动子

复合体。;σ;2、真核生物的起始

较原核生物复杂

◆顺式作用元件

(启动子/增强子)

◆转录因子(transcriptionfactor,TF)

RNA聚合酶Ⅱ所需的转录因子

---转录因子Ⅱ（TFⅡ）

;◆真核生物启动子

（1）DNA序列在转录起始点的5’端区(上游区)（2）-25bp：TATA盒（Hognessbox）

（3）-90bp：GC盒

（4）-70bp：CAAT盒

;RNA聚合酶Ⅱ催化的转录起始;真核生物转录起始复合物的组装

启动子TATA盒+TFⅡD

+D-A复合物(TFⅡD+TFⅡA)

+TFⅡB

+(RNA聚合酶+TFⅡF)复合物

+TFⅡE、TFⅡJ

+TFⅡH（解旋酶、蛋白激酶）

DNA解旋、RNA聚合酶C-端Ser磷酸化

从起始点向下游移动;;;二、延长----转录泡

（1）RNA聚合酶（核心酶）

◆与DNA模板紧密结合，沿3’5’方向移动

◆解旋作用：DNA解开17bp

◆聚合功能（不具外切酶功能）

（2）杂交螺旋

◆RNA-DNA形成12bp长的杂交螺旋

◆转录产物RNA沿5’3’方向延长

◆RNA延长速度：50个核苷酸/秒/每分子酶

;;三.终止

转录至模板某一位置

停止形成磷酸二酯键

RNA—DNA杂交链解开

DNA解链的部分重新形成双螺旋

RNA聚合酶离开DNA

;

终止的方式

;ρ-因子的作用

;新生RNA;不依赖ρ-因子的终止

DNA模板上有终止信号

转录出来的RNA

RNA聚合酶遇此结构

即停止工作。

DNA和RNA（dA：rU）

稳定性下降

;;四.转录的抑制作用

;mRNA可直接作为翻译的模板

rRNA

转录产物要加工、修饰

tRNA;●原核生物和真核生物mRNA的不同：;二.真核生物RNA转录后的加工

1、rRNA转录后的加工;;●转录后的加工和与核糖体的装配同时进行;前rRNA的切割特点：

在特殊序列位点由核仁小RNA(snoRNA)催化，snoRNA+蛋白质核仁小核蛋白(sno-RNP);●核酶---真核生物rRNA的自身剪切

;底物;;2、tRNA的加工;3、真核生物的mRNA转录后加工;●真核生物的mRNA转录后加工步骤：;5?pppGp