四种致兔腹泻病原菌检测+多重PCR法+（标准文本）.pdf

ICS65.020.30

CCSB41

DB50

重庆市地方标准

DB50/T1763—2024

四种致兔腹泻病原菌检测多重PCR法

2024-12-17发布2025-03-17实施

重庆市市场监督管理局发布

DB50/T1763—2024

前  言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由重庆市畜牧科学院提出。

本文件由重庆市农业农村委员会归口并组织实施。

本文件起草单位：重庆市畜牧科学院。

本文件主要起草人：杨柳、许国洋、牟豪、余远迪、戴玉娇、付利芝、李星、王永康、白运川。

I

DB50/T1763—2024

四种致兔腹泻病原菌检测多重PCR法

1范围

本文件规定了四种致兔腹泻病原菌检测多重PCR法的检测原理、仪器设备、试剂耗材、试剂配制、

方法步骤、结果描述及判定和生物安全要求。

本文件适用于兔粪便或肠容物中铜绿假单胞菌、产气荚膜梭菌、金黄色葡萄球菌和肠致病性大肠埃

希菌的检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，所注日期的引用文

件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用

于本文件。

GB/T6682分析实验用水规格和实验方法

GB19489实验室生物安全通用要求

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

多重聚合酶链式反应(多重PCR)Multiplepolymerasechainreaction

多重聚合酶链式反应指通过一次PCR反应同时对多个靶标进行扩增，结合一定的检测手段对扩增产

物进行检测，从而实现对多个靶标进行诊断的技术。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

PCR：聚合酶链式反应（Polymerasechainreaction）

DNA：脱氧核糖核酸（Deoxyribonucleicacid）

TAE：三羟甲基氨基甲烷醋酸盐（Tris（hydroxymethyl）aminomethaneacetatesalt）

eta：外毒素A（ExotoxinA）

nuc：耐热核酸酶(Thermostablenuclease）

eae：大肠埃希菌紧密素（E.coliattachingandeffacing）

5检测原理

用多重PCR法，对四种致兔腹泻病原菌的特异基因进行扩增，用琼脂糖凝胶电泳进行检测。

1

DB50/T1763—2024

6仪器设备

包括以下仪器设备：

a）PCR仪；

b）全自动凝胶成像仪；

c）电泳仪器；

d）超净工作台；

e）A2生物安全柜；

f）高速冷冻离心机；

g）电子天平：感量0.01g。

7试剂耗材

包括以下试剂耗材：



a）商品化的2Taq