2025年基因工程模拟试卷一及参考答案 .pdfVIP

博学之，审问之，慎思之，明辨之，笃行之。——《礼记》

基因⼯程模拟试卷⼀及参考答案

模拟试卷⼀及参考答案

⼀、名词解释（20分）

1.基因⼯程;

2.基因⽂库;

3.RT-PCR;

4.同裂酶;

5.gelretardation;

6.Oligonucleotide-directedmutagensis;

7.反义RNA技术;

8.α-互补;

9.YAC（Yeastartificialchromosome）;10.基因治疗

⼆、填空（20分）

1._________、_____________和逆转录酶的发现是基因⼯程诞⽣的三⼤技术⽀持。

2.1977年第⼀次在E.coli中合成了第⼀个⼈类蛋⽩。

3.质粒是存在于细菌细胞中能独⽴于染⾊体DNA⽽⾃主复制的、、环状的双链DNA分⼦。

4.DNA提取过程中，苯酚的作⽤是。⼄醇或异丙醇的作⽤是。

5.将噬菌体DNA转⼊细菌的⽅法主要有、两种。

6.M13载体最多只能插⼊3kb的⽚段，⽽pUC8与M13的杂交载体称为，如pEMBL8可以克隆10kb的⽚段。

7.建⽴⽣物的基因⽂库需要的克隆数⽬，可以通过公式进⾏计算。

8.Ti质粒分⼦太⼤，很难找到单⼀酶切位点，不适于直接作为载体使⽤，为此可以采⽤、两种策略。

9.E.coli中，基因表达的启动与终⽌依赖于基因周围的⼀组信号，其中最重要的三个信号是、、。

10.碱性磷酸酯酶可以去掉DNA分⼦5’端的基团，防⽌载体⾃连，提⾼重组率。

11.酵母中，主要有YEp、YIp、YRp三种类型的载体，其中的转化频率最⾼，⽽最稳定。

12.受体细胞经过⼀些特殊⽅法的处理后，细胞膜的通透性发⽣变化，成为能容许有外源DNA的载体分⼦进⼊的细胞，这种细

胞称为。

13.限制性内切酶EcoRI，其中Eco表⽰_________________，R表⽰___________，I表⽰_________________。

14.PCR反应的每⼀次循环都包括、、_____________三个步骤，这样通过25-30cycles，可以扩增⼤量的⽬的⽚段。

15.PCR反应中的⼀个引物序列为AGACTCAGAGAGAACCCTTT，其Tm值⼤约是。

16.当体系中存在酶量过⼤，⽢油浓度过⾼等情况时，限制性内切酶酶切往往产⽣额外⽚段，这种现象称为。

17.研究发现，的细菌质粒，可以重组整合到植物染⾊体中，受这⼀现象的启发产⽣了直接转移技术。

18.lacZ’基因插⼊失活鉴定需要在培养基中添加、两种物质，根据蓝⽩斑选择重组克隆。

19.RNaseH可以降解RNA:DNA杂交分⼦中的。

20.有些质粒在宿主体内只能产⽣1⾄⼏个拷贝，属于严谨型，另⼀些质粒在宿主体内可产⽣10-200个拷贝，称之为质粒。

三、选择题（10分）

百学须先立志。——朱熹

1.在植物遗传转化中，可以利⽤P1噬菌体，它含有基因，可以识别靶序列并将其切割下来。因此，我们可以将kan抗性基因置

于其靶序列中间，利⽤这⼀系统将kan抗性基因从转基因植株中剔除。

a.Cre

b.NPTII

c.tra

d.Cos

2.以下那种措施不能提⾼外源DNA与载体的重组率（）

a.载体除磷

b.外源⽚段：载体=2:1~10:1,增加碰撞机会，减少⾃⾝环化

c.利⽤TdT在3’端增加⼈⼯粘性末端，防⽌载体⾃⾝环化

d.只增加载体浓度

3.为了提⾼质粒DNA的产量，在细菌培养过程中，可加⼊（）增加质粒的拷贝数。

a.噬菌体

b.氯霉素

c.Kan

d.amp

4.下列哪种⽅法不能⽤于重组噬菌体的选择（）

a.利⽤lacZ’基因、cI基因的插⼊失活鉴定。

b.利⽤λ噬菌体对P2前噬菌体抑制的敏感性。

c.根据噬菌斑的⼤⼩。

d.根据λ基因组的⼤⼩。

5.低等真核⽣物如酵母、丝状真菌等的染⾊体可以通过下列哪种电泳⽅法进⾏分离。()

a.琼脂糖凝胶

b.聚丙烯酰胺凝胶

c.OFAGE

d.变性琼脂糖凝胶

6.Sanger-Coulson测序法需要单链的DNA，因此⼀般⽤作为克隆载体。

a.M13

b.plasmid

c.λ载体

d.YAC

7.PCR反应中，普通的Taq酶可以在3’端增加⼀个()，利⽤这⼀特点，可以使⽤特殊的载体将PCR⽚段克隆出来。

a.A

b.G

c.C

d.T

君子忧道不忧贫。——孔丘

8.利⽤E.coli⽣产某些⼈类蛋⽩存在⼀些问题，其中⼤部分问题可以解决，但()到⽬前为⽌仍⽆法解决。

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