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去留无意,闲看庭前花开花落;宠辱不惊,漫随天外云卷云舒。——《幽窗小记》
基于微流控芯片的生物细胞电阻抗成像检测技术
电阻抗成像(Electricalimpedancetomography,EIT)是一
种可视化的检测技术,该方法利用一系列分布在被测物体表
面的电极对该物体进行检测,以确定目标内部各个位置的导
电率或电容率分布。由于EIT具有无放射源、非侵入式检测、
检测速度快并且成本低等优点,目前已经被广泛应用于生物
学领域。在生物检测中,细胞在流动中位置分布的可视化检
测技术,不仅可用于实时监控细胞操作类应用,例如细胞分
离效果的检测,也可应用于验证微流道中细胞分布的计算模
型。
EIT技术最开始广泛应用在工业检测中的多相流或离散相检测上,
后通过发展被应用到医学检测中。传感器芯片的尺寸直径多在2.5
cm和10cm之间。随着技术的发展,传感器的尺寸已经从毫米级
器官检测减小到微米级细胞检测。目前在细胞检测方面,常用荧光
法、电化学分析法、质谱法等。荧光法利用荧光物质吸收特定波长
的光后发射荧光,通过测定其荧光强弱来进行定量分析。该方法具
有灵敏度高,选择性高,线性范围广,以及测定结果与斑点形状无
关等优点。但是,该方法需要对细胞进行标记,影响了检测速度。
电化学分析法根据细胞在溶液中的电化学性质,通过检测电流、电
博观而约取,厚积而薄发。——苏轼
压等信号变化来分析细胞种类与成分。但是该方法不能得到细胞的
位置分布信息。质谱法是一种检测离子质荷比(质量-电荷比)的分
析方法,检测对象在离子源中发生电离,形成离子束,进入质量分
析器得到质谱图,从而确定其质量。但是该方法检测速度低,不能
满足在线检测的临床需求。EIT具有非侵入、无辐射、成像速度快、
免标记和不伤害细胞机能的特点。所以EIT具有其他细胞检测方法
不具备的优点。
业界有研究使用EIT进行细胞检测。目前虽然已经开发出微尺度的
传感器,然而用于细胞流动检测的微尺度电阻抗成像技术(Micro
electricalimpedancetomography,μEIT)系统还未建立。由于
微尺度检测相比于宏观尺寸的检测技术更为复杂,其各项性能所产
生的影响更大,故很少有研究利用微流体传感器来实现微流道内细
胞的可视化分布检测。
在生物学电阻抗检测研究中,生物体的电阻抗和检测电流的频率有
关。在相对低频中,由于细胞膜的高容抗,检测电流无法穿过细胞,
只能绕过细胞,此时的细胞溶液阻抗较大;而在相对较高的频率中,
电流可以穿过细胞膜,细胞溶液中的检测电流主要为穿过细胞的电
流,从而细胞溶液的阻抗较小。对于细胞阻抗和检测电流频率的此
类现象,引出了细胞检测中最优频率的研究。
以铜为镜,可以正衣冠;以古为镜,可以知兴替;以人为镜,可以明得失。——《旧唐书·魏征列传》
将EIT技术开发到微尺度检测(即μEIT技术)主要需要解决的问题
有硬件和软件两方面。
对于硬件,μEIT传感器的电极应该在选材上选用惰性电极以减少
检测时的电化学反应,尺寸上足够小,并且规范为统一的结构和尺
寸,这样有利于提高检测时局部导电性变化的灵敏度。由于是微尺
度传感器,所以对传感器本身的制作精度有很高的工艺要求。传感
器的选材需要选择导电率和电容率极低的材料以减少电检测时的
噪声和电极间的互相干扰。工艺上,要求传感器流道内表面具有较
低的粗糙度,并且电极的位置足够精确。
对于软件,提高
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