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士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?——《论语》
分子生物学与中心法则
分子生物学是在分子水平上研究生命现象的科学。通过研究生物大分子(核酸、蛋白质)
的结构、功能和生物合成等方面来阐明各种生命现象的本质。分子生物学的发展大致可分为
以下三个阶段。
(一)准备和酝酿阶段
19世纪后期到20世纪50年代初,是现代分子生物学诞生的准备和酝酿阶段。在这一阶
段产生了两点对生命本质的认识上的重大突破:
1.确定了蛋白质是生命的主要基础物质
19世纪末Buchner兄弟证明酵母无细胞提取液能使糖发酵产生酒精,第一次提出酶
(enzyme)的名称,酶是生物催化剂。20世纪20-40年代提纯和结晶了一些酶(包括尿素
酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、黄酶、细胞色素C、肌动蛋白等),证明酶的本质是蛋白质。随
后陆续发现生命的许多基本现象(物质代谢、能量代谢、消化、呼吸、运动等)都与酶和蛋
白质相联系,可以用提纯的酶或蛋白质在体外实验中重复出来。
2.确定了生物遗传的物质基础是DNA
1944年O.T.Avery等证明了肺炎球菌转化因子是DNA;1952年A.D.Hershey和M.Cha-se
用DNA35S和32P分别标记T2噬菌体的蛋白质和核酸,感染大肠杆菌的实验进一步证明了
是遗传物质。在对DNA结构的研究上,1949-52年S.Furbery等的X-线衍射分析阐明了核苷
酸并非平面的空间构像,提出了DNA是螺旋结构;1948-1953年Chargaff等用新的层析和电
泳技术分析组成DNA的碱基和核苷酸量,积累了大量的数据,提出了DNA碱基组成A=T、
G=C的Chargaff规则,为碱基配对的DNA结构认识打下了基础。
(二)现代分子生物学的建立和发展阶段
这一阶段是从50年代初到70年代初,以1953年Watson和Crick提出的DNA双螺旋结
构模型作为现代分子生物学诞生的里程碑开创了分子遗传学基本理论建立和发展的黄金时
代。在发现DNA双螺旋结构同时,Watson和Crick就提出DNA复制的可能模型。其后在1956
年A.Kornbery首先发现DNA聚合酶;1958年Meselson及Stahl用同位素标记和超速离心分
离实验为DNA半保留模型提出了证明;1968年Okazaki(冈畸)提出DNA不连续复制模型;
1972年证实了DNA复制开始需要RNA作为引物;70年代初获得DNA拓扑异构酶,并对真
核DNA聚合酶特性做了分析研究;这些都逐渐完善了对DNA复制机理的认识。
(三)初步认识生命本质并开始改造生命的深入发展阶段
1967-1970年R.Yuan和H.O.Smith等发现的限制性核酸内切酶为基因工程提供了有力的工
具;1972年Berg等将SV-40病毒DNA与噬菌体P22DNA在体外重组成功,转化大肠杆菌,
使本来在真核细胞中合成的蛋白质能在细菌中合成,打破了种属界限;1977年Boyer等首先
将人工合成的生长激素释放抑制因子14肽的基因重组入质粒,成功地在大肠杆菌中合成得
到这14肽;1978年Itakura(板仓)等使人生长激素191肽在大肠杆菌中表达成功;1979
年美国基因技术公司用人工合成的人胰岛素基因重组转入大肠杆菌中合成人胰岛素。至今我
国已有人干扰素、人白介素2、人集落刺激因子、重组人乙型肝炎疫苗、基因工程幼畜腹泻
疫苗等多种基因工程药物和疫苗进入生产或临床试用,世界上还有几百种基因工程药物及其
它基因工程产品在研制中,成为当今农业和医药业发展
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