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2025年蛋白质工程试题 .pdfVIP

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古之立大事者,不惟有超世之才,亦必有坚忍不拔之志。——苏轼

蛋白质工程试题

1.蛋白质分子的构型与构象

构型:是分子中原子的特定空间排布。当构型相互转变时,必须

有共价键的断裂和重新形成。基本构型有L-型和D型两种。这种构型

无法通过单键的旋转相互转换。

构象:是组成分子的原子或基团围绕单键旋转而成的不同空间排布,

构象的转换不要求有共价键的断裂和重新形成,在化学上难以区分和分

离。

2.内核假设原理所谓内核是指蛋白质在大自然的进化中形成的保

守内部区域。这样的区域一般由氢键连接而成的二级结构单元组成。

内核假设原理就是所有蛋白质的折叠形式主要决定于其内核中残基的

相互作用和组织形式。遵循这样的内核原理意味着蛋白质工程无法创

造出超越天然蛋白质所具有二级结构的新蛋白质二级结构。

3.vantHoff焓平衡常数与焓/熵的关系式为:-RTlnK=△H-

T△S。取对数可以变为:lnK=-△H/RT+△S/R。进一步推导可以变

为:d(lnK)/d(1/T)=-△H/R。基于此,以lnK对1/T可以得到

一条曲线。在这条曲线上任何一点的斜率就是△H/R,其中的△H称为

vantHoff焓。通过解析vantHoff焓随温度变化的曲线特点,可以用

于测定蛋白质体系构象平衡的转变,主要是两态转变模型的分析。也

就是通过这样的曲线分析,可以预测蛋白质天然构象退在折叠时的容

易程度。

4.盒式突变法也称为片断取代法(DNAfragment

replacement)。这一方法的要点是利用目标基因中具有的适当的限

制性酶切位点,用具有任何长度、任何序列的DNA片断来置换或者取

代目标基因上的一段DNA序列。

5、熔球态在折叠途径中第一个可以观测到的中间体是柔性无序的

为折叠多肽链卷折成局部有组织的球状体,称为熔球体melton

globule。熔球体具有天然态的大多数二级结构,但不如天然结构致密,

蛋白质内部的密堆积相互作用尚未形成,环肽区和表面结构多数处于

操千曲尔后晓声,观千剑尔后识器。——刘勰

未折叠状态,侧链可以活动。非折叠态卷折成熔球体包含了蛋白质折

叠的主要奥秘—疏水侧链的包埋。

6.反向折叠设计在蛋白质工程中,全新蛋白质设计是以弥补天然

蛋白质结构和功能在应用方面的不足为目的,根据人类所希望的结构

和功能,采取工程手段,来人工设计新的氨基酸序列,这样的设计研

究称为反向折叠研究。在全新蛋白质设计的反向折叠研究中,需要采

取的基本策略是通过设计新的氨基酸序列,来加强或者减弱蛋白质的某

些相互作用力,使设计的序列能最终具有所希望的结构和功能。

7.功能基团的特异性修饰

蛋白质中,不仅末端氨基酸具有氨基和羧基,很多链中氨基酸侧

链也具有羟基、巯基、氨基和羧基等能进行特征性化学反应的功能基

团。利用这些功能基团的化学反应性可以进行蛋白质功能基团的特异

性修饰。

8.基因突变技术

在基因水平上设计并使某特定基因发生变异,对该基因所编码的

蛋白质进行改造,在突变基因表达后、用来研究蛋白质结构功能的一

种方法。

9.融合蛋白质

重组DNA技术允许在体外产生

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